神經免疫調節(jié)網絡中傳入信號和信號傳導模式的研究.pdf

1、神經免疫學是二十世紀末期生命科學領域發(fā)展最為迅速的學科之一，神經免疫學科的基礎理論“神經-內分泌-免疫調節(jié)網絡”學說已經得到學術界的認同。在“神經-內分泌-免疫調節(jié)網絡”研究的基礎上，相關的實驗證明了神經系統(tǒng)與免疫系統(tǒng)間存在功能調節(jié)作用。在神經免疫調節(jié)網絡信號傳導的解剖學構筑的研究中，調節(jié)網絡的功能相關的傳入信號和信號傳入通路構成是領域研究爭論的焦點之一。 本論文在課題組前期不同免疫狀態(tài)大鼠神經免疫調節(jié)功能相關腦區(qū)的定位研究工作

2、的基礎上，應用蛋白質組學研究中的表面加強激光解析電離-飛行時間-質譜技術(SELDI-TOF-MS)和基質輔助激光解析電離-飛行時間-質譜技術(MALDI-TOF-MS)及雙向電泳(2-DE)分離技術等方法對不同免疫狀態(tài)大鼠的外周血清和腦脊液組份進行比對分析，探索參與神經免疫調節(jié)的上傳信號及傳入通路構成模式，為進一步闡明神經免疫調節(jié)網絡的解剖學構筑提供實驗依據(jù)。 SELDI分析結果顯示，免疫組動物外周血中觀察到221個有顯著性差

3、異的信號峰，其中173個為表達量高于對照組的正向表達峰。實驗各組大鼠腦脊液的分析結果未見有統(tǒng)計學意義的特異性差異峰表達；在實驗組血清中檢測到的特異性差異峰也未在腦脊液中觀察到相對應的同步變化。在76個最高峰值為免疫2天的免疫功能相關性差異表達的免疫大鼠血清的信號峰中，根據(jù)差異信號峰的分子量、pI值和來源細胞在已知的神經介質、神經肽、激素和細胞因子等信號物質中進行分析篩選，推測可能成為神經免疫調節(jié)相關的傳入信號物質。經2-DE分離和MEL

4、DI-TOF-MS進一步分析和鑒定免疫大鼠血清中18KD特異組份，分析報告了18種來源的19個相關肽段序列，共247氨基酸，但相關結果不能滿足任何已知物質的氨基酸序列的排序。 我們的實驗結果證明： 1)本論文采用SELDI技術對不同免疫狀態(tài)組大鼠和正常對照組大鼠的血清進行對比分析的結果顯示實驗組表達了221個與免疫功能相關的差異信號峰；差異信號表達峰值的分布在免疫2天的有76個，免疫4天有1個，免疫6天有96個；差異峰值

5、統(tǒng)計學分析具有極顯著性差異，某些差異峰的特異性甚至表現(xiàn)為“全或無”的關系。這些實驗結果支持了神經免疫調節(jié)網絡傳入信號模式研究中兩個重要的代表性假說--“血行傳導通路”和“神經傳導通路”假說在神經免疫調節(jié)網絡傳入信號通路領域研究中達成的共識，即免疫活性細胞釋放功能活動相關信號物質到體液(血液)中，進而啟動神經免疫調節(jié)功能。 2)對不同實驗組大鼠的腦脊液組份對比分析的結果顯示，腦脊液中并不存在與免疫功能變化相關的神經免疫調節(jié)功能的傳

6、入信號物質，血液中免疫功能相關的信號物質的變化沒有在腦脊液中平行反映。神經免疫調節(jié)功能相關信號傳入模式不是“血液-腦脊液-接觸腦脊液的神經元系統(tǒng)-中樞腦區(qū)”的血行傳導方式。本論文神經免疫調節(jié)網絡信號傳導模式研究結果不支持“血行傳導通路”假說。 3)根據(jù)最高峰值在免疫2天的免疫功能相關的差異信號峰的分子量、PI值和來源細胞，在已知的神經介質、神經肽、激素和細胞因子等信號物質中進行比對篩選，推測細胞因子IL-8、IL-15和IL-1

7、8等三個組份可能成為免疫系統(tǒng)釋放的跨系統(tǒng)傳遞的神經免疫調節(jié)功能相關的傳入信號物質。 4)本論文應用蛋白質組學研究技術的標準方法2-DE-MALDI-TOF-MS技術分析免疫大鼠血清中IL-1分子在神經免疫調節(jié)網絡傳入通路中的地位和作用，發(fā)現(xiàn)免疫活性細胞釋放到血液中的IL-1不可能成為免疫系統(tǒng)釋放的跨系統(tǒng)傳遞的信號物質，參與神經免疫調節(jié)網絡功能，否定了“血行傳導通路”和“神經傳導通路”假說在神經免疫調節(jié)網絡傳入信號通路領域研究中關