中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷與神經(jīng)免疫調(diào)節(jié)功能相關信號鏈研究.pdf

1、研究目的:探討腦缺血再灌注損傷大鼠模型中局部神經(jīng)系統(tǒng)損傷信號與外周損傷、修復功能相關信號的表達聯(lián)系，IL-6/IL-6R在神經(jīng)免疫調(diào)節(jié)功能相關信號鏈中的作用。
　　 研究方法:本論文研究分二個部分，1）制備腦缺血再灌注損傷大鼠模型，應用酶聯(lián)免疫分析技術分析外周血清中炎癥損傷相關信號IL-1β、IL-6、IL-6R和HSP70的表達情況，應用免疫組化技術分析中樞腦缺血損傷局部損傷及損傷修復相關信號IL-1β、IL-6、IL-6R、

2、TNF-α、MMP-9、ICAM-1、MCP-1和TGF-β的表達變化，從而探究腦缺血再灌注損傷模型中樞損傷局部及外周循環(huán)系統(tǒng)中炎癥反應相關信號的表達情況。
　　 2)以IL-6基因敲除鼠及正常對照組C57BL/6小鼠為研究對象制備不同免疫狀態(tài)的免疫損傷模型，應用ELISA法檢測試驗各組小鼠血清中免疫損傷相關信號IL-1β和TNF-α的表達情況，應用免疫組化技術檢測實驗各組小鼠神經(jīng)免疫調(diào)節(jié)相關腦區(qū)LH、AA表達功能信號IL-1β

3、的表達情況，以研究IL-6/IL-6R信號傳導通路在神經(jīng)免疫調(diào)節(jié)網(wǎng)絡中的作用。
　　 研究結果:
　　 1)腦缺血再灌注損傷模型組大鼠與假手術組及空白組大鼠比較，中樞腦缺血損傷局部的炎癥損傷相關信號IL-6、IL-6R、IL-1β、TNF-α、MMP-9、ICAM-1、MCP-1、TGF-β表達有統(tǒng)計學差異(P＜0.05)，表現(xiàn)為功能活動相關的增高表達，各指標相關信號隨時間變化的趨勢基本相似，呈經(jīng)典的雙峰形模式，12h～

4、48h達到其表達量的第1個峰值，72h～144h達到其表達量的第2個峰值;
　　 2)腦缺血再灌注損傷模型組大鼠與假手術組及空白組大鼠比較，外周血中的炎癥損傷相關信號IL-6、IL-6R、L-1β和HSP70表達有統(tǒng)計學差異(P＜0.05)，表現(xiàn)為功能活動相關增高變化，各指標相關信號隨時間變化的趨勢與中樞炎癥損傷信號基本相似;
　　 3)不同免疫狀態(tài)IL-6基因敲除小鼠神經(jīng)免疫調(diào)節(jié)功能相關腦區(qū)LH、AA腦區(qū)，IL-1β的

5、表達水平明顯低于正常對照組C57BL/6小鼠，免疫4天組及6天組的降低有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);
　　 4)在基礎狀態(tài)下，IL-6基因敲除鼠中樞神經(jīng)免疫調(diào)節(jié)腦區(qū)LH、AA腦區(qū)，以及外周血中IL-1β表達水平均低于正常對照組C57BL/6小鼠，且其差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);
　　 5)不同免疫狀態(tài)IL-6基因敲除小鼠外周血中炎癥損傷相關信號TNF-α(一)過性高于正常對照組C57BL/6小鼠，在免疫兩天組實驗結

6、果差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，后表達水平下降未表現(xiàn)出統(tǒng)計學差異。
　　 研究結論:
　　 1)在腦缺血再灌注損傷情況下，中樞損傷腦區(qū)局部及外周血中炎癥損傷和損傷修復信號分子均呈功能相關的活化狀態(tài)，表明細胞因子參與了中樞神經(jīng)系統(tǒng)局部的損傷及損傷修復過程和全身的網(wǎng)絡功能調(diào)節(jié)，在中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮關鍵作用，細胞因子通過神經(jīng)-內(nèi)分泌-免疫調(diào)節(jié)網(wǎng)絡調(diào)控損傷局部及全身的應答反應。
　　 2)不同免疫狀態(tài)