Lewis y抗原及α1,2-巖藻糖轉移酶基因在三組卵巢癌細胞系中的表達.pdf

1、前言:卵巢癌在婦科惡性腫瘤中病死率居首位，卵巢癌的發(fā)生發(fā)展機制一直是婦科腫瘤基礎與臨床研究探索的重點，了解卵巢癌生物學行為的控制方法及發(fā)生發(fā)展的分子機制對于卵巢癌的預防及治療十分重要。
　　 卵巢癌的發(fā)生與發(fā)展是一個極其復雜的多因素的過程，目前對其發(fā)生機理尚不清楚。近年來，糖復合物和腫瘤的關系受到廣泛關注。糖復合物是細胞膜的重要組成部分，對細胞-細胞、細胞-分子的識別十分重要，參與信號轉導、分子粘附等分子相互作用，與細胞生長、凋

2、亡、運動、分化等生命過程密切相關。細胞癌變后細胞膜上的糖復合物，特別是其糖鏈部分發(fā)生結構和量的變化。卵巢癌主要表現(xiàn)為Ⅱ型糖鏈的改變，如Lewisy抗原。研究表明75％的上皮性卵巢癌出現(xiàn)Lewisy不同程度的過量表達，且表達增高的患者預后不良。在前期工作中利用基因轉染技術將人α1，2-巖藻糖轉移酶（α1，2-FT）基因轉入卵巢癌細胞系RMG-Ⅰ，建立了Lewisy穩(wěn)定高表達卵巢癌細胞系RMG-Ⅰ-H，發(fā)現(xiàn)轉染后RMG-Ⅰ-H細胞對化療藥5

3、-FU、卡鉑等的敏感性下降，提示Lewisy抗原具有提高卵巢癌細胞生存能力的作用。
　　 本實驗檢測不同生物學性狀的卵巢癌細胞系中Lewisy抗原及α1，2-巖藻糖轉移酶(α1，2-FT)基因FUT1表達變化，探討其對卵巢癌細胞增殖、耐藥和轉移的影響。
　　 方法:采用免疫細胞化學法、免疫細胞熒光法測定α1，2-FT基因轉染前后的人卵巢癌細胞系RMG-Ⅰ和RMG-Ⅰ-H、人卵巢癌高轉移細胞系HO8910PM及親本細胞系H

4、O8910、人卵巢癌耐藥細胞系COC1/DDP及親本細胞系COC1中Lewisy抗原的表達。利用RT-PCR法及reαl-time PCR法檢測上述三組細胞中α1，2-FT基因(FUT1)表達的變化。
　　 結果:經免疫細胞化學方法分析，α1，2-FT基因的產物，Lewisy抗原，在RMG-Ⅰ-H、HO8910PM及COC1/DDP細胞系中的表達強度分別為53.90士4.33，37.31±0.19和28.52±1.45，與相應的

5、親本細胞系RMG-Ⅰ（32.18士0.64）、HO8910（14.96±0.61）及COC1（19.26±0.83）比較均明顯升高，且廣泛分布于細胞膜上。與RMG-Ⅰ相比，RMG-Ⅰ-H中的α1，2-FT基因表達上調3.07倍；與HO8910相比，HO8910PM中的α1，2-FT基因表達上調2.13倍；與COC1相比，COC1/DDP中的α1，2-FT基因表達上調2.42倍。
　　 結論:Lewisy及α1，2-巖藻糖轉移酶基