寡核苷酸芯片分析人卵巢癌細(xì)胞系RMG-1轉(zhuǎn)染α1，2-FT基因后癌相關(guān)基因的表達(dá)差異.pdf

1、目的：利用基因芯片技術(shù)對(duì)α1，2-巖藻糖轉(zhuǎn)移酶(α1，2-fucosyltransferase，α1，2-FT)基因轉(zhuǎn)染后人卵巢癌細(xì)胞RMG-1-H和空載體處理的相同細(xì)胞RMG-1-C的mRNA進(jìn)行檢測(cè)，分析其基因表達(dá)的差異，探討轉(zhuǎn)染α1，2-FT對(duì)卵巢癌細(xì)胞系RMG-1癌相關(guān)基因的影響。 方法: 利用一步法提取卵巢癌細(xì)胞RMG-1-H及RMG-1-C總RNA并制備cDNA，合成生物素標(biāo)記的cRNA探針，對(duì)兩種樣品進(jìn)行熒

2、光交換，分別與人腫瘤相關(guān)寡核苷酸基因芯片進(jìn)行雜交，經(jīng)洗片后用LuxScan 10KA雙通道激光掃描儀掃描芯片熒光信號(hào)圖像，用GenePix Pro 4.0圖像分析軟件對(duì)掃描圖像進(jìn)行數(shù)字化處理，在GoMiner在線數(shù)據(jù)庫進(jìn)行信息查詢。 結(jié)果: 細(xì)胞系RMG-1-H有88種差異性表達(dá)基因，其中60種基因表達(dá)增強(qiáng)，28種基因表達(dá)降低。對(duì)其進(jìn)行基因功能的檢索，發(fā)現(xiàn)在分子功能、生物學(xué)行為和細(xì)胞成分定位三個(gè)分支上，轉(zhuǎn)染α1，2-FT

3、基因后RMG-1-H在蛋白質(zhì)結(jié)合、核苷酸結(jié)合，細(xì)胞增值、DNA依賴性轉(zhuǎn)錄的調(diào)節(jié)、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、蛋白氨基酸磷酸化、轉(zhuǎn)錄、細(xì)胞黏附等方面表現(xiàn)出了比較明顯的改變，并推測(cè)α1，2-FT基因轉(zhuǎn)染主要在細(xì)胞核水平影響著卵巢癌細(xì)胞的生物學(xué)行為。 結(jié)論: 轉(zhuǎn)染α1，2-FT基因使卵巢癌細(xì)胞系RMG-1-H蛋白質(zhì)結(jié)合、核苷酸結(jié)合，細(xì)胞增值、DNA依賴性轉(zhuǎn)錄的調(diào)節(jié)、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、蛋白氨基酸磷酸化、轉(zhuǎn)錄、細(xì)胞黏附等方面在RNA水平上調(diào)，為進(jìn)一步研究α