促進(jìn)花生根瘤鐵跨膜運(yùn)輸（GmDmt1;1）同源基因（Nramp family）的克隆及功能預(yù)測(cè)分析.pdf_第1頁(yè)
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1、鐵營(yíng)養(yǎng)是豆科植物-根瘤菌這一共生體的形成、根瘤的發(fā)育、維持和保證類菌體固氮酶活性的必需營(yíng)養(yǎng)元素，促進(jìn)鐵元素跨類菌體周膜(Peribacteriodmembrane，PBM)運(yùn)輸和吸收是增強(qiáng)豆科植物共生固氮的重要機(jī)制之一。從大豆(Glycinemax)根瘤類菌體周膜(PBM)中分離鑒定出與NRAMP基因家族具有同源性的(GmDmt1；1)基因，該基因能夠在根瘤的侵染、根瘤發(fā)育和根瘤固氮時(shí)表達(dá)，從而保證了共生固氮體系對(duì)鐵的不斷需求，大豆與花

2、生(ArachishypogaeaL.)相比，他們二者不僅都是雙子葉植物，在缺鐵脅迫條件下呈現(xiàn)機(jī)理Ⅰ反應(yīng)，而且又是通過(guò)根瘤共生固氮的豆科植物，因此，他們二者的基因同源性更強(qiáng)，花生植株體內(nèi)應(yīng)該具有(GmDmt1；1)的同源基因。本研究從間作玉米改善花生鐵營(yíng)養(yǎng)狀況并促進(jìn)根瘤固氮功能增強(qiáng)的現(xiàn)象為切入點(diǎn)，通過(guò)已經(jīng)測(cè)序和證明功能的不同植物的同源基因蛋白序列呈現(xiàn)高度一致的cDNA片段分別設(shè)計(jì)保守性較強(qiáng)的外側(cè)和內(nèi)側(cè)雙重引物即嵌套引物(nestedpr

3、imer)，利用RT-PCR反應(yīng)和分子克隆分離和鑒定控制花生根瘤鐵吸收利用的同源基因(GmDmt1；1)部分cDNA片段(860bp)，與大豆的(GmDmt1；1)基因相比，二者的cDNA序列片段同源保守性為82％，蛋白序列則高達(dá)89％，而且該蛋白功能預(yù)測(cè)表明該基因?qū)儆贜ramp基因家族，并且該基因片段已經(jīng)具有六個(gè)典型的跨膜序列。表明在花生根瘤中存在促進(jìn)鐵元素跨類菌體周膜(PBM)運(yùn)輸和吸收并增強(qiáng)花生固氮的(GmDmt1；1)同源基因，

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