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1、以花生根結(jié)線蟲(Meloidogynearenaria)一對無毒和毒性近等基因系(near-isogeniclines,NIL)為材料,用抑制差減雜交技術(shù)(SuppressionSubtractiveHybridization,SSH),通過反向Northernblot和反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈式反應(yīng)(ReverseTranscription-PolymeraseChainReaction,RT-PCR)篩選獲得了22個在毒性和無毒M.arena
2、ria間差異表達的cDNA片段。經(jīng)過BLASTX分析,其中的12個cDNA片段與已知的基因沒有同源性,其余的10個和新秀麗小桿線蟲(Caenorhabditiselegans)、真菌和細菌的基因有較高的同源性。cDNA片段MAAV-117、MAAV-136、MAAV-270和MAAV-551只在無毒的M.arenaria中表達,在毒性的M.arenaria中不表達。其余的18個cDNA只是表達量上有差異。沒有發(fā)現(xiàn)只在毒性M.arenar
3、ia中表達,而在無毒M.arenaria中不表達的cDNA片段。利用該方法只建成了正向差減cDNA文庫(用毒性根結(jié)線蟲cDNA為Driver,無毒根結(jié)線蟲cDNA為Tester),反向差減cDNA文庫(用無毒根結(jié)線蟲cDNA為Driver,毒性根結(jié)線蟲cDNA為Tester)的差減效率很低。該研究結(jié)果第一次表明,當根結(jié)線蟲二齡幼蟲和抗性寄主互作以后,無毒和毒性線蟲群體之間基因表達有差異,而且都在無毒線蟲群體中特異性表達,預(yù)示著這些差異表
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