高氧致新生大鼠肺損傷T淋巴細胞動態(tài)變化的研究.pdf

1、目的： 探討高氧致新生大鼠肺損傷過程中脾臟及胸腺中T淋巴細胞的動態(tài)變化。 方法： 72只出生12小時內的清潔級Sprague-Dawley(S-D)大鼠(簡稱新生大鼠)作為研究對象。隨機分為2組：Ⅰ、空氣對照組，Ⅱ、高氧暴露組，每組36只。Ⅰ組置于正?？諝庵形桂B(yǎng)，Ⅱ組置于80-85％氧濃度下喂養(yǎng)。分別于第1、4、7、14、21天時，以常規(guī)組織學方法觀察肺臟形態(tài)結構變化；運用常規(guī)計數(shù)法檢測脾臟中淋巴細胞數(shù)量變化；采

2、用流式細胞術檢測脾臟中CD4+、CD8+T細胞的百分比的變化；以混合淋巴細胞反應(MTT法)檢測脾淋巴細胞對植物血凝素和自身肺組織的增殖反應；用常規(guī)組織學和免疫組化法觀察胸腺形態(tài)結構變化及增殖細胞核抗原(PCNA)表達和CD4+、CD8+細胞分布。 結果： 1.肺臟組織學變化：與空氣對照組相比，高氧組4d時肺組織充血、水腫；7d時肺組織出血、水腫、炎性細胞浸潤明顯；14d時炎癥反應減輕，肺間質增寬，纖維增生；21d肺泡數(shù)

3、量減少，肺間質纖維細胞增生，肺泡節(jié)段性高充氣與膨脹不全交替，形成特征性囊泡樣改變。 2.脾組織中淋巴細胞數(shù)量與活性變化：實驗4d時，高氧組脾臟中淋巴細胞數(shù)量開始增多，CD4+、CD8+淋巴細胞百分比較對照組明顯增多(p<0.01)，至實驗7d時，CD4+淋巴細胞百分比明顯高于對照組(p<0.01)，此后CD4+、CD8+淋巴細胞百分比逐漸下降，到實驗21d時CD4+、CD8+淋巴細胞百分比接近對照組，而絕對數(shù)明顯低于對照組(p值

4、均<0.01)；此外，淋巴細胞活性檢驗發(fā)現(xiàn)，實驗4d至7d時，脾淋巴細胞對自身肺組織和對PHA刺激的增殖反應活性較對照組均明顯增高(p值均<0.01)；實驗14d至21d時，脾淋巴細胞對自身肺組織刺激的增殖反應活性逐漸下降，但均明顯高于對照組(p值均<0.01)，而對PHA刺激后的增殖反應活性均明顯低于對照組(p值均<0.01)。 3.胸腺組織學變化：與對照組相比，實驗4d至7d時，高氧組胸腺指數(shù)逐漸升高，PCNA表達逐漸增強，

5、兩組間差異均有顯著性統(tǒng)計學意義(p值均<0.01)：但實驗14d至21d時，高氧組胸腺指數(shù)、PCNA指數(shù)逐漸下降，其中PCNA指數(shù)在21d時已明顯低于對照組(p<0.01)，形態(tài)學檢查發(fā)現(xiàn)高氧組胸腺蜷曲退化，脂肪細胞及纖維細胞增生，免疫組化顯示CD4+、CD8+淋巴細胞數(shù)量減少且呈區(qū)域性分布。 結論： 1.80-85％高氧持續(xù)暴露21d可造成新生大鼠高氧性肺損傷，病理表現(xiàn)主要為肺泡節(jié)段性高充氣和與膨脹不全交替的囊泡樣改變

6、等，與新生兒慢性肺損傷的病理改變相符。 2.高氧性肺損傷早期脾臟中CD4+、CD8+淋巴細胞百分比明顯增高、活性逐漸增強，后期脾臟CD4+、CD8+淋巴細胞數(shù)量明顯減少，淋巴細胞活性顯著減低。 3.高氧性肺損傷可導致新生大鼠的胸腺發(fā)生階段性病理改變，即病理性成熟加速迅速轉變?yōu)椴±硇晕s，表現(xiàn)為CD4+、CD8+淋巴細胞數(shù)量明顯減少并呈異常的點狀局限性和區(qū)域性分布。 4.高氧性肺損傷過程中有自身反應性T淋巴細胞的參