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1、目的:通過比較不同濃度的TGF-β1對骨髓成纖維細胞增殖和對其Smad2、Smad7 mRNA表達水平的影響,以及這些影響在正常者和慢性骨髓增殖性疾病病人骨髓成纖維細胞之間的差異,以了解骨髓纖維化的原理. 方法:分離2例缺鐵性貧血(作為正常對照)、一例原發(fā)性血小板增多癥和一例慢性粒細胞白血病病人骨髓液中的成纖維細胞,用含10﹪FCS的DMEM低糖培養(yǎng)液,在37℃,5﹪CO<,2>培養(yǎng)箱中培養(yǎng),0.25﹪胰蛋白酶+0.02﹪EDT
2、A消化傳代;MTT法測定0.01、0.1、1、2、5ng/m1的TGF-β1對正常者和慢性骨髓增殖性疾病病人的骨髓成纖維細胞增殖作用的影響;RT-PCR測定0.01、0.1、1、5ng/ml的TGF-β1對正常者和慢性骨髓增殖性疾病病人的骨髓成纖維細胞Smad2、Smad7 mRNA表達的影響. 結(jié)果:MTT法顯示2ng/ml及5ng/mlTGF-β1對骨髓成纖維細胞有促增殖作用(與對照組相比P值小于0.05),同一濃度的TGF
3、-β1對正常者和骨髓增殖性疾病病人骨髓成纖維細胞促增值作用沒有統(tǒng)計學意義上的差異;RT-PCR顯示Smad2和Smad7mRNA的表達在TGF-β1濃度為0-lng/ml之間時隨著其濃度的增加而增加,而在TGF-β1濃度為5ng/ml時,Smad2 mRNA表達量有所下降.相同濃度TGF-β1刺激下,正常者和骨髓增殖性疾病病人骨髓成纖維細胞Smad2和Smad7 mRNA的表達沒有顯著差異. 討論:一定濃度的TGF-β1可促使骨
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