NUP98-PMX1抑制c-FOS基因的轉錄及其機制的研究.pdf

1、核孔復合物(nuclearporecomplex，NPC)是存在于細胞核核膜上的一種很大的蛋白復合體，它負責細胞核與細胞漿之間物質與信息的交流。核孔復合物是由一類稱為核孔素(nucleoporin，NUP)的蛋白組成。近年來，在白血病中發(fā)現(xiàn)越來越多的染色體易位累及NUP214和NUP98。除了NUP214-ABL外，所有的累及核孔素的染色體易位形成的融合蛋白都有FG重復序列。所以，F(xiàn)G重復序列在核孔素相關的融合蛋白致白血病中起著重要的作

2、用。通過對全部已報道的5例伴有t(1；11)(q23；p15)染色體易位的患者臨床資料的分析，我們發(fā)現(xiàn)NUP98-PMX1融合基因在年齡較大的男性急性髓性白血病(AML)患者中出現(xiàn)的機率更高，且拓撲異構酶抑制劑的應用可能與t(1；11)染色體易位的形成相關。此外，NUP98-PMX1可能與NUP98-HOXA9一樣能夠與BCR-ABL1協(xié)同導致慢性粒細胞白血病(chronicmyeloidleukemia，CML)進入加速或急變期。

3、 為了更好的認識NUP98相關的融合蛋白的致白血病機制，我們對從一例慢性粒細胞白血病急變患者中克隆的NUP98-PMX1融合基因進行了深入的功能學研究。在細胞定位實驗中，我們發(fā)現(xiàn)NUP98-PMX1融合蛋白彌散樣分布于細胞核內，這一定位有別于野生型的NUP98或PMX1的定位。在報告基因實驗中，我們發(fā)現(xiàn)NUP98-PMX1能顯性負地抑制PMX1或SRF對c-FOS的轉錄激活作用。隨后，用實時定量聚合酶鏈反應(PCR)和免疫蛋白印跡(

4、Westernblot)的方法，我們又證實了NUP98-PMX1同樣可以抑制細胞內源的c-FOS的表達。進一步的研究發(fā)現(xiàn)組蛋白去乙?；敢种苿?TrichostatinA，TSA)可以抑制NUP98-PMX1的轉錄抑制活性。我們還用體外和體內蛋白相互作用實驗證實了MUP98-PMX1的通過其FG結構域與轉錄共抑制因子組蛋白去乙?；?(histonedeacetylase1，HDAC1)相互作用。此外，我們還證實了NUP98-HOXA9