木糖醇對糖尿病大鼠腎小管損害的實驗研究.pdf

1、目的：木糖醇因具有改善糖代謝、促進胰島素分泌及抑制酮體生成等作用而廣泛用于糖尿病及暫不能進食患者的腸外營養(yǎng)等方面的治療；我國于上世紀90年代中期始將木糖醇用于糖尿病食品甜味添加劑中。與其它甜味劑相比，木糖醇相對廉價，制作工藝簡單，甜度與蔗糖相當，作為糖尿病食品甜味添加劑仍不失為一種理想的選擇；而近年研究顯示：長期輸注一定劑量、短期大劑量靜脈應用木糖醇會因人體內血尿酸水平升高而致腎損害，甚至有因急性腎衰致死的個案報道；而口服木糖醇是否可致

2、腎損害目前尚未見報道。本研究旨在觀察喂飼木糖醇是否可使糖尿病大鼠血液中尿酸、尿囊素水平升高致腎小管損害，并探討其機制，為木糖醇可否作為糖尿病患者食品甜味添加劑及/或添加比例提供實驗數(shù)據(jù)。 方法： 1.反相高效液相色譜法(reversed-phase high performance liquid chromatography，RP-HPLC)同時檢測血清、尿液中尿酸、尿囊素和肌酐方法的建立：血清在檢測前需先用5％的高氯酸

3、溶液去蛋白，尿液標本則要先稀釋和過濾。用國產C<,18>反相色譜柱為固定相，磷酸鹽緩沖液為流動相，以峰面積進行定量。 2.將100只雄性wistar大鼠分為五組：隨機選取16只為正常對照組(NC組)，余84只造成糖尿病模型，取80只成模大鼠平均分為糖尿病對照組(DC組)、5％木糖醇組(D+5％Xy組)、10％木糖醇組(D+10％Xy組)和20％木糖醇組(D+20％Xy組)。糖尿病造模予鏈脲佐菌素(STZ)50mg/kg尾靜脈一次

4、性注射，72小時后測血糖≥16.7mol/L為造模成功。大鼠成模后，NC組、DC組喂養(yǎng)標準飼料，其余三組在標準飼料中分別加入低(5％)、中(10％)、高(20％)劑量的木糖醇連續(xù)喂養(yǎng)4周和8周。于4周、8周末各組大鼠分別留尿、采血，處死動物各8只，摘取同側腎臟通過免疫組化方法和計算機圖像分析技術觀察腎小管MCP和COX-2的表達。 結果： (1)RP-HPLC可同時檢測血清、尿液中的尿酸、尿囊素和肌酐，當三者濃度在5～1

5、000μmol/L范圍內時與峰面積具有良好的相關性，r=0.999，日內和日間變異<7％，回收率在96.1％～102.9％之間。 (2)各組體重和血糖的變化：4、8周時糖尿病各組與同期NC組比較，體重均減輕(P<0.05)，血糖升高(P<0.05)；含木糖醇的糖尿病各組與同期DC組比較，體重均有所增加，血糖均有所下降，其中D+20％Xy組體重增加、血糖下降有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。 (3)腎重指數(shù)的變化：4、8周時糖

6、尿病各組較同期NC組升高(P<0.05)；D+20％Xy組較同期DC組下降(P<0.05)。 (4)尿酸、尿囊素的變化：糖尿病各組血尿酸、尿囊素水平均較同期Nc組升高(P<0.05)，尿尿酸、尿囊素水平較同期Nc組下降；D+5％Xy和D+10％Xy組血尿酸、尿囊素水平較同期DC組升高，尿尿酸、尿囊素水平較同期DC組下降；D+20％Xy組血尿酸、尿囊素水平較同期DC組下降(P<0.05)，尿尿酸、尿囊素水平較同期DC組升高(P<0

7、.05)。 (5)肌酐、肌酐清除率的變化：4、8周時各組血肌酐、尿肌酐、肌酐清除率差別無統(tǒng)計學意義。 (6)各組尿酸清除分數(shù)的比較：糖尿病各組均較同期NC組下降(P<0.05)；D+5％Xy、D+10％Xy組較同期DC組下降(P<0.05)；D+20％Xy組則較同期DC組升高。(7)各組腎小管MCP-1和COX-2的表達：4、8周時糖尿病各組MCP-1和COX-2的表達均較同期NC組增強(P<0.05)；D+5％Xy、D

8、+10％Xy組表達強于同期DC組(P<0.05)；D+20％Xy組表達弱于同期DC組；糖尿病每組8周與4周比較，表達增強(P<0.05)。 結論： 1.RP-HPLC法同時檢測血清、尿液尿酸、尿囊素和肌酐，具有快速、需樣量小和靈敏度高的特點，操作簡便，穩(wěn)定性及重復性好，完全可運用于科研和臨床的需要。 2.實驗表明，木糖醇對STZ誘導的糖尿病大鼠具有降低血糖，增加體重的作用；糖尿病大鼠的病理生理變化致其血液中生成尿