木糖醇對大鼠腎小球系膜細胞損傷的實驗研究.pdf

1、目的： 1．觀察不同劑量木糖醇（Xy）對鏈脲佐菌素（STZ）誘導(dǎo)的糖尿?。―M）大鼠腎小球超微結(jié)構(gòu)的影響，并探討可能的機制。 2．觀察不同濃度Xy、葡萄糖、尿酸培養(yǎng)條件下大鼠腎小球系膜細胞（MCs）的增殖情況及Ⅳ型膠原（Col-Ⅳ）和基質(zhì)金屬蛋白酶-2（MMP-2）的表達水平，觀察Xy對腎臟細胞是否有直接損害作用以進一步評價Xy作為DM患者食品甜味添加劑的利弊。 方法： 1．體內(nèi)實驗：將100只雄性Wis

2、tar大鼠分為五組：隨機選取16只為正常對照組（NC組），余84只予STZ50mg/kg尾靜脈一次性注射，72 h后測血糖≥16．7mmol/L為造模成功，取80只成模大鼠按照喂養(yǎng)飼料不同平均分為糖尿病對照組（DC組）、5％Xy組（D+5％Xy組）、10％Xy組（D+10％Xy組）和20％Xy組（D+20％Xy組）。于8 w末處死動物，摘取左側(cè)腎臟，應(yīng)用透射電子顯微鏡觀察腎小球超微結(jié)構(gòu)的改變。 2．體外實驗：采用噻唑藍（MTT）

3、法分別檢測24h、48h和72h時不同濃度Xy（1、5、10、20mmol/L）、尿酸（0．1、0．2、0．4、0．8mmol/L）、葡萄糖（15、25mmol/L）培養(yǎng)條件下大鼠MCs的增殖情況，通過測定光密度（OD）值評價各干預(yù)因素對細胞有無損害作用及其作用強度；應(yīng)用免疫細胞化學法測定48h時各組細胞Col-Ⅳ和MMP-2的表達。 結(jié)果： 1．體內(nèi)實驗：①各組大鼠體重和血糖的變化：8 w時DM各組與NC組比較，體重均

4、減輕（P<0．05），血糖升高（P<0．05）；喂食Xy的各組與DC組比較，體重均有所增加，血糖均有所下降，其中D+20％Xy組體重增加、血糖下降有統(tǒng)計學意義（P<0．05）。②腎重指數(shù)的變化：DM各組較NC組升高（P<0．05）；D+20％Xy組較DC組下降（P<0．05）。③腎小球超微結(jié)構(gòu)的變化：透射電鏡下可見NC組腎小球形態(tài)結(jié)構(gòu)正常，系膜區(qū)無擴張；DC組基底膜厚薄不均，局部呈均質(zhì)樣增厚，足細胞腫脹，部分足突扁平融合，系膜細胞和系膜

5、基質(zhì)增生；與DC組相比，D+20％Xy組無明顯變化，而D+10％Xy組腎小球損傷更嚴重：基底膜均質(zhì)樣增厚，系膜細胞和基質(zhì)明顯增生，系膜區(qū)擴張顯著。 2．體外實驗：①不同濃度Xy對MCs增殖的影響：各Xy組OD值與同期NC組相比差別無統(tǒng)計學意義，各Xy組間差別亦無統(tǒng)計學意義（P>0．05）；②不同濃度尿酸對MCs增殖的影響：同期內(nèi)各尿酸干預(yù)組OD值均大于NC組，差異有統(tǒng)計學意義（P<0．05）；③不同濃度葡萄糖對MCs增殖的影響：

6、兩高糖組OD值均大于同期NC組（P<0．05）；隨葡萄糖濃度升高，OD值有增加趨勢，但兩高糖組間差別無統(tǒng)計學意義（P>0．05）；④不同濃度Xy對MCs分泌Col-Ⅳ和MMP-2的影響：各濃度Xy培養(yǎng)條件下，MCs表達Col-Ⅳ和MMP-2的水平與NC組相比并無變化（P>0．05）；⑤不同濃度尿酸對MCs分泌Col-Ⅳ和MMP-2的影響：各濃度尿酸組與NC組相比，Col-Ⅳ呈高表達，MMP-2呈低表達，且0．4 mmol/L和0．8 m

7、mol/L尿酸組與NC組差別有統(tǒng)計學意義（P<0．05）；⑥不同濃度葡萄糖對MCs分泌Col-Ⅳ和MMP-2的影響：各高糖組與NC組相比Col-Ⅳ呈高表達，MMP-2呈低表達，差別有統(tǒng)計學意義（P<0．05）。 結(jié)論： 1．Xy對STZ誘導(dǎo)的DM大鼠具有降低血糖、增加體重的作用；動物實驗表明Xy可升高血清尿酸水平，后者可加重糖尿病大鼠的腎小球超微結(jié)構(gòu)改變。 2．木糖醇對體外培養(yǎng)的MCs并無直接損傷作用，而尿酸和高