大鼠腦缺血再灌注后GRP78和GADD153表達(dá)研究.pdf

1、目的：腦缺血再灌注后的神經(jīng)細(xì)胞凋亡機(jī)制目前仍未完全闡明。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激是細(xì)胞的一種自我保護(hù)機(jī)制，但是過(guò)強(qiáng)或持續(xù)時(shí)間過(guò)長(zhǎng)的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激則引起細(xì)胞凋亡。本實(shí)驗(yàn)擬通過(guò)對(duì)缺血再灌注大鼠腦內(nèi)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激標(biāo)志物GRP78 和GADD153 表達(dá)及神經(jīng)細(xì)胞凋亡的研究，探討內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激與腦缺血再灌注后神經(jīng)細(xì)胞凋亡的關(guān)系。 材料與方法：72 只SD 大鼠隨機(jī)分為模型組和假手術(shù)組。模型組均用線栓法造成大腦中動(dòng)脈阻塞，2h 后實(shí)現(xiàn)再灌注。按再灌注時(shí)間不同分為

2、2h、6h、12h、24h 和48h 組，進(jìn)行如下實(shí)驗(yàn)：①TUNEL 法檢測(cè)細(xì)胞凋亡；②RT-PCR 法檢測(cè)GRP78 和GADD153 mRNA 表達(dá)；③免疫組化和Western-blot 檢測(cè)GRP78 和GADD153 蛋白表達(dá)。 結(jié)果：①假手術(shù)組偶有神經(jīng)細(xì)胞凋亡，模型組神經(jīng)細(xì)胞凋亡在缺血再灌注24h 達(dá)高峰，與其他各組相比，差異顯著（P<0.01）；②GRP78在各實(shí)驗(yàn)組均有表達(dá)，于再灌注12h 達(dá)高峰（P<0.05）