反相高效液相色譜法在藥物分析中的應(yīng)用研究.pdf

1、高效液相色譜法 (Higll Performance Liquid Chromatography，HPLC) 是70年代迅速發(fā)展起來(lái)的一項(xiàng)高效、快速的分離分析技術(shù)，是現(xiàn)代分離測(cè)試的重要手段。鑒于其簡(jiǎn)便、快速、靈敏、準(zhǔn)確的特點(diǎn)，目前，在醫(yī)藥、衛(wèi)生、食品、環(huán)保等各個(gè)領(lǐng)域已得到廣泛應(yīng)用。 本論文建立了用反相高效液相色譜法測(cè)定中藥中幾種成分的方法，由綜述和研究報(bào)告兩部分組成，綜述部分簡(jiǎn)單概述了液相色譜的歷史、一般原理、儀器構(gòu)成及其在藥物

2、分析中的應(yīng)用，研究報(bào)告部分建立了太太口服液和蜂膠片中幾種成份的測(cè)定方法，包括：反相高效液相色譜分別測(cè)定太太口服液中的阿魏酸、肉桂酸和槲皮素，反相高效液相色譜法測(cè)定蜂膠片中的咖啡酸和同時(shí)測(cè)定蜂膠片中五種組分。 1．反相高效液相色譜測(cè)定太太口服液中的阿魏酸建立了太太美容口服液中阿魏酸含量的HPLC測(cè)定方法。色譜柱為Shim-Pack VP - ODS柱(150×4.6 mm，5 μm)；流動(dòng)相為甲醇 - 水 - 冰醋酸(32∶66∶

3、2)；流速1 mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)為323 nm。阿魏酸的線性范圍為0.252～5.04μg/mL，r=0.9993，平均回收率為99.9％(n=5)，RSD為1.2％。實(shí)驗(yàn)證明該方法簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確，適合于太太美容口服液中阿魏酸含量的測(cè)定。 2．反相高效液相色譜法測(cè)定太太口服液中的肉桂酸利用色譜柱Shim-Pack VP-ODS柱(150×4.6 mm，5μm)和預(yù)柱Shim-PackVP-ODS柱(10×4.6 mm，5.

4、0 μm、)；以甲醇-水-冰醋酸(體積比)=70∶29∶1為流動(dòng)相的條件下，實(shí)現(xiàn)了對(duì)太太口服液中肉桂酸的分離測(cè)定。流速：1 mL/min；280 nnl處進(jìn)行檢測(cè)。肉桂酸的線性范圍為0.012～4.80μg/mL，r=0.9998，平均回收率為99.1％(n=5)，RSD為3.26％。實(shí)驗(yàn)表明該方法簡(jiǎn)便、快速，應(yīng)用于實(shí)際樣品太太口服液中肉桂酸含量的測(cè)定，結(jié)果令人滿意。 3．反相高效液相色譜法測(cè)定太太口服液中的槲皮素。

5、在這一節(jié)，我們建立了太太美容口服液中槲皮素含量的HPLC測(cè)定方法。色譜柱為Shim-Pack VP-ODS柱(150×4.6 mm，5 μm)和預(yù)柱Shim-Pack VP-ODS柱(10×4.6 mm，5.0 μm)；流動(dòng)相為甲醇 - 含0.2％磷酸的緩沖溶液(60∶40)；流速：1 mL/min；254 nm處檢測(cè)。結(jié)果表明槲皮素在 0.00720～0.360 μg/mL范圍內(nèi)，濃度與峰面積有良好的線性關(guān)系(r=0.9999)，槲皮

6、素的回收率為93.9％～98.6％(n=5)，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.07％。應(yīng)用于實(shí)際樣品中槲皮素含量的測(cè)定，取得了很好的結(jié)果。 4．反相高效液相色譜法測(cè)定蜂膠片的咖啡酸利用反相高效液相色譜法測(cè)定了蜂膠片中咖啡酸含量。色譜柱采用Shim-Pack VP-ODS柱(150×4.6 mm，5 μm)和預(yù)柱Shim-Pack VP-ODS柱(10×4.6mm，5.0μm、)；在流動(dòng)相為甲醇 - 水 - 甲酸(35∶64∶1)和流速1 mL

7、/min條件下進(jìn)行分離測(cè)定；檢測(cè)波長(zhǎng)為323 nm?？Х人岬木€性范圍為0.120～24.0μg/mL，r=0.9995，平均回收率為101.0％(n=5)，RSD為2.69％。實(shí)驗(yàn)表明該方法簡(jiǎn)便、快速，適合于蜂膠片中咖啡酸含量的測(cè)定5．反相高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定蜂膠片中的五種組分采用反相高效液相色譜法測(cè)定了蜂膠片中的阿魏酸、苯甲酸、水楊酸、肉桂酸和槲皮素五種組分。色譜柱為Shim-Pack VP-ODS柱(150×4.6 mm，5μm)

8、和預(yù)柱Shim-Pack VP-ODS柱(10 i．d．×4.6mm，5.0μm)；流動(dòng)相為含0.2％磷酸的緩沖溶液和甲醇，采用梯度洗脫，流速為1 ml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為：0-20 min，323 nm；20-25 min，230 nm；25-37 min，236 nm；37-45 min，280 nm；45-60 min，254 nm。五種組分的回收率分別介于94.2％-111.2％，實(shí)驗(yàn)表明在較寬的濃度范圍內(nèi)線性較好(r=0.99