高效液相色譜法在食品安全中的應(yīng)用

1、高效液相色譜在食品安全中的應(yīng)用高效液相色譜在食品安全中的應(yīng)用（鄒同婷，山東師范大學(xué)人口資源與環(huán)境學(xué)院環(huán)境本0901）摘要：摘要：高效液相色譜法作為化學(xué)分離分析的一種極其重要的手段，在食品安全領(lǐng)域有著及其廣泛的應(yīng)用。本文將介紹高效液相色譜法在三聚氰胺的檢測(cè)中的應(yīng)用、高效液相色譜法在食品添加劑中的檢測(cè)中的應(yīng)用以及高效液相色譜法在農(nóng)藥殘留檢測(cè)中的應(yīng)用。關(guān)鍵詞：高效液相色譜；食品安全；三聚氰胺；食品添加劑；食品添加劑；農(nóng)關(guān)鍵詞：高效液相色譜；食

2、品安全；三聚氰胺；食品添加劑；食品添加劑；農(nóng)藥檢測(cè)殘余；山梨酸；苯甲酸藥檢測(cè)殘余；山梨酸；苯甲酸HighperfmanceliquidchromatographyinfoodsafetyapplicationsAbstract:Highperfmanceliquidchromatographyasachemicalseparationanalysisofaveryimptantmeansinthefieldoffoodsafetywit

3、hitswideapplication.Thispaperintroducesthehighperfmanceliquidchromatographyinthedetectionofmelaminetheapplicationofhighperfmanceliquidchromatographyinfoodadditivesinthedetectiontheapplicationofhighperfmanceliquidchromato

4、graphyusedindetectionofpesticideresidues.Keywds:highperfmanceliquidchromatographyfoodsafetymelaminefoodadditivesfoodadditivespesticidedetectingresidualsbicacidbenzoicacid色譜法又被稱為“色譜分析”，是一種分離和分析方法，在分析化學(xué)以及生物化學(xué)領(lǐng)域有著極其重要的應(yīng)用。色譜

5、法的主要原理是，根據(jù)不同的物質(zhì)在不同相態(tài)中的選擇性分配，以流動(dòng)相對(duì)固定相中的混合物進(jìn)行洗脫，這樣一來，混合物中不同的物質(zhì)會(huì)以不同的速度沿著固定相移動(dòng)，最終達(dá)到分離的目的。色譜法有著分離效率高、應(yīng)用范圍廣、分析速度快、樣品用量少的特點(diǎn)。在食品分析中有著較為廣泛的應(yīng)用。高效液相色譜法簡(jiǎn)稱HPLC，是在20世紀(jì)60年代末70年代初發(fā)展起來的，我國(guó)高效液相色譜技術(shù)的應(yīng)用開始于20世紀(jì)70年代，從20世紀(jì)90年代開始，HPLC開始被列入檢測(cè)食品中

6、營(yíng)養(yǎng)成分、添加劑以及有害物質(zhì)的國(guó)標(biāo)方法。一、一、高效液相色譜法在三聚氰胺檢測(cè)中的應(yīng)用高效液相色譜法在三聚氰胺檢測(cè)中的應(yīng)用三聚氰胺是一種產(chǎn)自煤的化學(xué)物質(zhì)，大多用于生產(chǎn)塑料以及肥料，是一種化工產(chǎn)品，不是食品添加劑，不能用于人的食品當(dāng)中，會(huì)對(duì)人的身體健康以及生命安全造成極其嚴(yán)重的損害，“三鹿奶粉”就給我們敲響了警鐘。目前檢測(cè)三聚氰胺的方法主要有高效液相色譜法、酶聯(lián)免疫法、氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法、液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法。其中液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法由于能夠快

7、速地對(duì)三聚氰胺定性與定量，已成為大家首選的檢測(cè)方法。質(zhì)譜法是通過將試樣分子裂解為分子離子和各種離子碎片的集合，并按質(zhì)荷比（mz）大小進(jìn)行分離、記錄其信息的分析方法。質(zhì)譜法具有分析速度快、靈敏度高以及譜圖解析相對(duì)簡(jiǎn)單等優(yōu)點(diǎn)。根據(jù)質(zhì)譜圖提供的信息可進(jìn)行多種有機(jī)物及無機(jī)物的定性和定量分析、復(fù)雜化合物的結(jié)構(gòu)分析、試樣中各種同位素比例測(cè)定及固體表面的結(jié)構(gòu)和組成分析等。無論是哪種類型的質(zhì)譜儀都有把試樣分子轉(zhuǎn)化為離子的離子源，把不同質(zhì)荷比的離子分開的

8、質(zhì)量分析裝置和可以得到試樣質(zhì)譜圖的檢測(cè)裝置。（一）高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定雞蛋中三聚氰胺殘留幾乎不吸附，而隨著pH值的降低，吸附量隨之增大，當(dāng)pH值小于4時(shí)，達(dá)到完全吸附?？紤]到SPE小柱在pH值小于2時(shí)會(huì)發(fā)生降解，所以實(shí)驗(yàn)萃取時(shí)調(diào)樣液pH值等于3.5左右。此外，為了盡可能減少干擾影響和得到最大的回收率，我們進(jìn)行了洗脫試驗(yàn)。取5mL分別含50mgL的苯甲酸、山梨酸標(biāo)準(zhǔn)品，參照樣品進(jìn)行處理。分別以5mL純水、10%～100%的甲醇溶液洗

9、脫，測(cè)定洗脫液中苯甲酸、山梨酸的含量，計(jì)算回收率。試驗(yàn)結(jié)果表明，以純水洗脫時(shí)無苯甲酸、山梨酸洗脫，而用大于70%甲醇洗脫時(shí)，苯甲酸、山梨酸的回收率均接近于100%。故實(shí)驗(yàn)采用70%甲醇洗脫，用純水清洗。并且在試驗(yàn)苯甲酸、山梨酸在不同比例乙酸銨甲醇時(shí)的分離效果的時(shí)候，發(fā)現(xiàn)乙酸銨甲醇比例為75：25時(shí)的分離效果最好，而且分析時(shí)間較短。由此可以確定實(shí)驗(yàn)條件如下。色譜柱條件為色譜柱:HCC18150mm4.6mm5um色譜柱；流動(dòng)相：乙酸銨（0

10、.02molL）：甲醇體積比為75：25；流速：1.0mLmin；檢測(cè)波長(zhǎng)：240nm；柱溫：30℃，制備藥品時(shí)超聲波清洗器中超聲10min，pH=3.5，0.45μm濾膜過濾。（二）高效液相色譜法測(cè)定食品中抗氧化劑BHABHTPG人們?yōu)榱俗屖称繁ｕr經(jīng)常要在食品中添加一定量的抗氧化劑。但抗氧化劑過量會(huì)損害人體健康。合格食品的抗氧化劑的添加量必須符合國(guó)家衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)[12]。對(duì)食品中抗氧化劑的測(cè)定一直沿用薄層法、比色法、氣相色譜法[3]。報(bào)道

11、的HPLC法只是用于油樣的測(cè)定且前處理要用乙腈反復(fù)萃取不僅操作繁雜而且乙腈的毒性太大價(jià)格昂貴。這里介紹一個(gè)同時(shí)、快速、準(zhǔn)確地分析食品中抗氧化劑丁基羥基茴香醚(BHA)、二丁基羥基甲苯(BHT)和焦性沒食子酸丙酯(PG)的高效液相色譜法。主要試劑Waters201型高效液相色譜儀M490型紫外檢測(cè)器680型溶劑梯度儀740型數(shù)據(jù)處理機(jī)U6K進(jìn)樣器。正己烷為分析純乙醇為優(yōu)級(jí)純甲醇為色譜純水為高純水。BHABHTPG均為德國(guó)E.Merok產(chǎn)品

12、純度為99.98%。色譜柱為RadialPAKC18流動(dòng)相為甲醇水(928VV)用H3PO4調(diào)pH為3.0流速為0.8mLmin柱溫為室溫檢測(cè)波長(zhǎng)為280nm檢測(cè)靈敏度為0.05Aufs進(jìn)樣量為10μL。經(jīng)紫外掃描采用280nm作為它們的吸收波長(zhǎng)獲得了理想的色譜圖PGBHABHT的保留時(shí)間分別為3.598min4.455min6.431min。由此可見，同時(shí)、快速、精確測(cè)定抗氧化劑BHABHTPG的高效液相色譜法。此法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、回收率

13、高、重現(xiàn)性好。另外，此方法除了適用于食品的測(cè)定外還適用于飼料的測(cè)定。三、高效液相色譜法在農(nóng)藥檢測(cè)殘余中的應(yīng)用三、高效液相色譜法在農(nóng)藥檢測(cè)殘余中的應(yīng)用我國(guó)是農(nóng)業(yè)大國(guó)也是農(nóng)藥消費(fèi)大國(guó)。農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中長(zhǎng)期使用農(nóng)藥不但對(duì)人畜有一定的毒害作用而且也會(huì)對(duì)環(huán)境和生物鏈造成極大的破壞進(jìn)而對(duì)生命機(jī)體產(chǎn)生“三致”作用(致癌、致畸、致突變)。水果蔬菜上的農(nóng)藥殘留問題由來已久。隨著人們生活水平的逐步提高水果蔬菜質(zhì)量安全問題已成為制約我國(guó)果蔬產(chǎn)業(yè)發(fā)展的重要因素加強(qiáng)水