液相色譜法在醫(yī)學臨床中的應用

1、反相高效液相色譜法在醫(yī)學臨床中的應用引言反向高效液相色譜法是色譜中的一種特種技術。應用本法研究藥物在正常人體內的藥動學，具有簡便，迅速，準確等特點。RPHPLCUV的分析檢測方法，該方法不需要特殊的設備，而且分析方法的穩(wěn)定性好，精密度高，時間段，過程簡單，可以作為藥物定量分析方法。自從反相高效液相色譜法應用以來，有關此理論和實際應用的文獻已經大量出版。目前，反相高效液相色譜法已經為許多實驗室的常規(guī)手段。理論概要建立反相高效液相色譜法測定

2、人體內某部位藥物濃度?；衔飯猿峙まD高水流動相色譜法柱喝反相高效液相色譜法列高有機流動相洗脫。在反相高效液相色譜法或何物分離的基礎上他們的疏水性。肽可以分開運行的有機溶劑的線性漸變。研究運行60╱60梯度chromatographing未知時。60╱60梯度，梯度開始接近100％的水和坡道在60分鐘內以60％的有機溶劑。大部分肽﹙長度在10至30個氨基酸殘基﹚洗脫時間梯度達到30％的有機。醫(yī)學上的應用1.用藥后的房水進行定量測量：眼內藥

3、代動力學實驗：雙眼滴入眼液，將獲取的房水用反相高效液相色譜法進行定量測量。結果滴眼后不同時間測定的房水中的藥物濃度不同，實驗結果提示局部點眼獲得的房水濃度低于對大多數(shù)真菌的最低抑菌濃度說明單獨點眼效果不好。所以應配合全身用藥，改進用藥途徑增加眼內穿透力，以及增加點眼次數(shù)來克服此弊端。因此頻繁點眼也是增加眼內穿透性，縮短病程的重要手段。病例病程較長滴眼次數(shù)過少可能事原因之一。2.測量人體組織液中藥物濃度：本研究采用乙酸乙酯直接提取血漿樣品

4、，操作簡便，提取后樣品中雜質干擾少，各藥物的萃取回收率高，均在75%以上，且通過有機溶劑的提取和濃縮，測定的靈敏度進一步提高。由于乙酸乙酯比重較輕，與血漿混合后不易乳化，且液面處于上層，所以實驗操作更方便。在進行流動相條件篩選時，考察不同配比的分離效果，發(fā)現(xiàn)在甲醇：水﹙65:35﹚時，各色譜峰及內標間分離效果好，且峰形尖銳，柱效高，完成一次測定只需15min。㏎選擇230nm波長是經過分析發(fā)現(xiàn)目標成分在230nm紫外吸收系數(shù)均比較大，可

5、以提高靈敏度。由于本方法流動相中無緩沖鹽和改性試劑，因此測試過程中平衡和沖洗色譜系統(tǒng)的時間比較短，有利于提高測定效果，更合適臨床應用。3.藥物腹腔注射在家兔房水中的藥代動力學研究：測定腹腔注射藥物后不同時間家兔房水中的質量濃度，計算其藥代動力學參數(shù)，研究藥代動力學特點。關于樣品的處理和流動相選擇，以甲醇處理樣品和選擇甲醇：水：磷酸緩沖液或甲醇：水為流動相的報道較多。也有選用高氯酸處理血樣和甲醇：水：冰醋酸為流動相的報道。我們采用高氯酸沉

6、淀放水中的微量蛋白，一甲醇：水：冰醋酸=35:65:0.2為流動相，色譜柱為DiamonsilC18不銹鋼柱，在波長為250nm紫外光下對腹腔注射藥物量濃度的測定。通過高氯酸空白，防水空白和房水溶解藥物標準品對照測定，以及回收率測定為87.60％，日內RSD為4.0％，日間RSD為5.32％，無其他峰干擾。結果表明，本方法具有特異，靈敏，快速等優(yōu)點，使用于對房水藥物質量濃度的測量。4.藥物在玻璃體內注射的藥代動力學研究：取玻璃體樣品，用

7、反相高效液相色譜法測定玻璃體腔內N質量濃度。用DAS軟件計算主要的藥代動力學參數(shù)。增殖性玻璃體視網膜病變的治療主要是通過手術促使增生性病變的視網膜復位，但仍王仁杰張亞超9.血漿同型半胱氨酸高效液相色譜法測定余意君邵姣梅張帆嚴江濤汪道文10反向高效液相色譜法測定葒草中原兒茶酸的含量周雯，劉麗娜，蘭燕宇，王愛民，李勇軍，何迅，王永林11反向高效液相色譜測定法同時測定人血漿中5種鎮(zhèn)靜催眠藥濃度梁湘輝1，戴智勇2，劉文恩1(中南大學湘雅醫(yī)院1檢

8、驗科；2藥劑科，長沙410008)12.反相高效液相色譜法測定色鹽桿菌新種ST307的DNAGCt001％含量崔春曉1，李鵬飛2，曹文瑞2，戴美學1，夏志潔”13.紅棗環(huán)磷酸腺苷(cAMP)的提取工藝米東，王瑛，李明潤(天津市醫(yī)藥科學研究所，天津300020)14.葛根素腹腔注射在家兔房水中的藥代動力學研究鄧新國!胡世興!張清炯!張曉慧!鐘國平!湯麗芬!吳玨珩15.反相高效液相色譜法分析甲錠反應液中甲錠含量文介榮(湖南省桃江縣第一中學，