PEG修飾干擾素的合成與生物活性的研究.pdf

1、目的：為了改善干擾素（IFN）的穩(wěn)定性和生物學(xué)活性，采用高分子設(shè)計(jì)原理，以活化的聚乙二醇（PEG）來修飾干擾素，以幾種不同的PEG修飾劑對(duì)干擾素分別進(jìn)行修飾，比較不同PEG及不同修飾率修飾干擾素與未修飾干擾素在熱穩(wěn)定性、酶穩(wěn)定性、耐酸堿性方面的差異,并對(duì)產(chǎn)物進(jìn)行抗病毒性能與抑制腫瘤細(xì)胞增殖性能的檢測(cè)。
　　 方法：以順丁烯二酸酐(Man)和烯丙基化合物為單體，經(jīng)自由基共聚制備了大分子量的PEG為長(zhǎng)側(cè)鏈的聚合物來修飾干擾素。采用S

2、DS－PAGE電泳法測(cè)定PEG修飾干擾素的分子量，以證實(shí)合成產(chǎn)物是否與理論設(shè)計(jì)相符；通過考察熱穩(wěn)定性、酶穩(wěn)定性、耐酸堿性來比較PEG修飾干擾素與未修飾干擾素之間性能的差異；用Hep-2細(xì)胞－VSV病毒體系檢測(cè)合成產(chǎn)物抗病毒性能；采用MTT法測(cè)定合成產(chǎn)物對(duì)腫瘤細(xì)胞增殖的影響。
　　 結(jié)果：以不同的修飾劑和不同的修飾率制備了九種PEG修飾IFN；DS-PAGE電泳結(jié)果表明有聚合物－IFN結(jié)合物生成，分子量為6萬（以修飾劑APEO90

3、—4萬修飾）的產(chǎn)物三種、分子量為4萬（以修飾劑APEO90—2萬與APEO60—2萬修飾）的產(chǎn)物六種；PEG修飾干擾素的熱穩(wěn)定性、酶穩(wěn)定性、耐酸堿性比未修飾干擾素均有明顯的增加；MTT法實(shí)驗(yàn)表明PEG修飾的IFN對(duì)腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)抑制作用比未修飾IFN增強(qiáng)，9種PEG修飾IFN（產(chǎn)物編號(hào)1-9）分別提高了56.3％、35.2％、17.8％、42.3％、23.5％、14.6%、45.5%、26.5%、11.4％，而其抗病毒性能則有不同程度的下