皮膚創(chuàng)口感染鉤體病模型建立及鉤體對巨噬細(xì)胞吞噬的影響.pdf

1、鉤端螺旋體病是一種由致病性鉤端螺旋體感染引起的人獸共患病，在人類和動物中廣為流行。人主要是通過直接接觸被感染的動物尿液或間接接觸被鉤端螺旋體污染的水源而被感染。通常鉤端螺旋體病侵入人體是通過破損的皮膚創(chuàng)口或完整的粘膜，進(jìn)入血液、淋巴液或沿組織間隙直接蔓延等多種途徑在機(jī)體內(nèi)播散。鉤端螺旋體病有多種臨床表現(xiàn)，輕者可表現(xiàn)為發(fā)熱、頭痛、腓腸肌壓痛、眼結(jié)膜充血、淋巴結(jié)腫大等，嚴(yán)重的鉤端螺旋體病患者可出現(xiàn)肺彌漫性出血、黃疸、肝腎功能衰竭等。目前鉤體

2、病發(fā)病機(jī)制尚未闡明。 實(shí)驗(yàn)室內(nèi)復(fù)制鉤端螺旋體病模型一般是通過腹腔注射感染豚鼠或金黃地鼠，其感染途徑與自然感染途徑不同，可能在一定程度上影響了鉤端螺旋體病發(fā)病機(jī)制的研究。為了更好地模擬自然感染途徑，我們建立了皮膚創(chuàng)口感染鉤端螺旋體病豚鼠模型，比較致病性鉤端螺旋體賴型有毒株Lai株，賴型無毒株IPAV株所引起的豚鼠病變，并在體外觀察致病性鉤端螺旋體賴型有毒株Lai株、賴型無毒株IPAV株及非致病性鉤端螺旋體Patoc型Patoc Ⅰ

3、株的對豚鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響，綜合分析鉤體病的發(fā)病機(jī)制。 結(jié)果發(fā)現(xiàn)：有毒株Lai株皮膚創(chuàng)口感染豚鼠后72 h，豚鼠肺臟和后腹膜開始輕度出血，感染后96 h，豚鼠出現(xiàn)典型鉤體病病變，表現(xiàn)為黃疸、彌漫性肺出血、腎出血和后腹膜出血等。感染后144h，豚鼠內(nèi)臟出血更加嚴(yán)重，2只發(fā)生口鼻涌血并且死亡。免疫組化顯示在肺、腎和后腹膜等出血部位可見大量鉤體分布。無毒株IPAV株感染豚鼠后各時間段未見明顯病變，免疫組化檢測在肺、腎等臟器也

4、未見鉤體抗原分布。有毒株Lai株和無毒株IPAV株均可引起感染創(chuàng)口炎細(xì)胞浸潤，Lai株引起感染創(chuàng)口周圍皮膚和肌層炎細(xì)胞浸潤，IPAV株則局限于感染創(chuàng)口及皮下組織。炎細(xì)胞浸潤在感染后2～8 h以中性粒細(xì)胞為主，24 h以后主要以巨噬細(xì)胞為主，144 h后炎細(xì)胞逐漸消失。有毒株Lai株通過破損的皮膚創(chuàng)口感染豚鼠后，可在組織間隙繁殖并向周圍組織侵襲，感染24 h后可見感染創(chuàng)口及周圍組織出血，隨著時間延長，出血逐漸向深層組織蔓延且逐漸嚴(yán)重，出血

5、部位炎細(xì)胞浸潤不明顯。免疫組化顯示在感染創(chuàng)口及周圍組織出血部位毛細(xì)血管周圍有大量Lai株鉤體分布，鉤體分布與組織出血在時間和空間上相吻合。透射電鏡可見毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)有大量Lai株鉤體，血管基膜損傷。內(nèi)臟出血處也可查見Lai株鉤體，且出血程度與鉤體分布有關(guān)。無毒株IPAV株不向周圍組織侵襲，不引起豚鼠出血，局部毛細(xì)血管周圍也未見鉤體聚集。透射電鏡可見巨噬細(xì)胞伸出偽足吞噬Lai株和IPAV株鉤體。體外研究發(fā)現(xiàn)豚鼠腹腔巨噬細(xì)胞對三種不同毒