高烏甲素經(jīng)皮滲透特性及其生物黏附凝膠劑的研究.pdf

1、高烏甲素(又稱刺烏頭堿，拉巴烏頭堿，lappaconitine)，是從毛莨科植物高烏頭(AconitumSinomontanumNakai)的根中提取的一種二萜類生物堿，具有較強的中樞鎮(zhèn)痛、局部麻醉及解熱和消炎作用，對惡性腫瘤疼痛和其它頑固性疼痛，如三叉神經(jīng)痛、紅斑性狼瘡、風(fēng)濕性及類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、帶狀皰疹痛及牙痛等均有良好療效，但其現(xiàn)有的給藥方式存在諸多不合理之處，嚴(yán)重阻礙了該藥的進一步推廣應(yīng)用。由于高烏甲素具有劑量小，藥效強，有一定毒

2、性，肝臟首過效應(yīng)強的特點，因此可以認為經(jīng)皮吸收制劑是其比較理想的給藥劑型。為此本文詳細研究了高烏甲素的基本透皮特性，并在此基礎(chǔ)上進一步研制了高烏甲素生物黏附凝膠劑。 本文對高烏甲素的某些基本物理化學(xué)性質(zhì)進行了測定，并采用改進的Franz擴散池，對高烏甲素體外經(jīng)大鼠腹部皮膚的滲透性進行了研究，考察了溫度、pH值以及常用促滲劑氮酮、油酸、月桂醇對高烏甲素滲透系數(shù)的影響。結(jié)果表明，去除角質(zhì)層后，高烏甲素在大鼠皮膚中的滲透系數(shù)為完整皮膚

3、的19.5倍，說明角質(zhì)層是高烏甲素透皮的主要屏障。皮膚滯留量實驗表明，高烏甲素主要滯留于皮膚的角質(zhì)層。溫度、pH值及緩沖對的組成對高烏甲素的透皮有顯著影響。高烏甲素經(jīng)大鼠腹部皮膚的擴散過程近似零級過程。在本文所考察的促滲劑中，氮酮、油酸、月桂醇均使得高烏甲素的滲透性有所增加，增滲比均大于1，以油酸的促滲效果最好，增滲倍數(shù)為5.21。在凝膠劑的制備過程中，首先對凝膠基質(zhì)(Carbopol、PEG、CMC-Na、HPMC)進行了優(yōu)選?？疾炝?/p>

4、不同基質(zhì)對凝膠體外釋放和透皮特性的影響，用體外釋放試驗確定處方中Carbopol與HPMC的比例。結(jié)果表明，選用3％Carbopol-934P和2％HPMC(50000～70000mpa·s)(1：2)為基質(zhì)時，凝膠釋藥速度最快，生物黏附性較強，并且在該凝膠中高烏甲素的釋放表現(xiàn)為零級釋放。 對文獻報道較多、性質(zhì)較為接近皮下環(huán)境的5種常用的接受液(生理鹽水、生理鹽水/乙醇、蒸餾水、PEG400飽和水溶液、pH6.8磷酸緩沖液)進行

5、了篩選研究。從每種接受液的日內(nèi)回收率及日間回收率及回歸方程的線性關(guān)系看，以生理鹽水/乙醇液結(jié)果較好。從不同濃度乙醇接受液各自的Q-t方程看，以70％乙醇生理鹽水液為接受液的透皮速率常數(shù)為最高，時滯短，且乙醇的揮發(fā)性對透皮速率幾乎無影響，故高烏甲素凝膠的透皮實驗研究選擇70％乙醇生理鹽水液為接受液。載藥量對高烏甲素凝膠劑透皮吸收亦有影響。通過實驗，確定選用1.0g凝膠進行透皮實驗。 本實驗還考察了氮酮(Azone)、丙二醇(PG)

6、、油酸(OA)、月桂醇(LA)4種透皮吸收促滲劑單獨應(yīng)用和任意兩種合用對高烏甲素凝膠的透皮促進作用。結(jié)果以Azone+PG、LA+PG、OA+PG為復(fù)合促滲劑時釋藥速率顯著提高，其中以O(shè)A+PG促滲作用最強。并采用均勻設(shè)計法，從氮酮、丙二醇、油酸的組合中篩選高烏甲素凝膠劑的促滲劑，結(jié)果當(dāng)油酸：丙二醇：氮酮為(3：10：0)時，促透效果最好。驗證性試驗結(jié)果與預(yù)測結(jié)果基本一致。建立非線性回歸模型，用遺傳算法對高烏甲素凝膠透皮速率方程參數(shù)進行

7、優(yōu)化，結(jié)果證明所建模型合理，擬合程度較好，對藥物在皮膚的滲透過程進行了準(zhǔn)確的模擬，表明此法在模型參數(shù)優(yōu)化計算方面具有重要實際應(yīng)用價值。在以上研究工作的基礎(chǔ)之上，采用正交設(shè)計對高烏甲素凝膠劑的處方進行了篩選和優(yōu)化，得到了凝膠劑的較優(yōu)處方。 本文對高烏甲素凝膠劑進行了質(zhì)量控制方法研究。采用薄層色譜法、紫外分光光度法及高效毛細管電泳法(HPCE)鑒別高烏甲素，用反相高效液相法測定凝膠中高烏甲素的含量，并對凝膠劑的初步穩(wěn)定性進行了考察。

8、結(jié)果表明，HPCE法可在4min之內(nèi)快速、有效地鑒別出高烏甲素，操作簡便，重現(xiàn)性好，專屬性強，可作為凝膠劑的有效成分鑒別手段之一。方法平均回收率為(99.07±1.13)％，RSD1.13％。該制劑具有良好的穩(wěn)定性，通過加速試驗推算出其有效期為2.6年。 本文首次建立了兔血清中高烏甲素的高效液相一二級質(zhì)譜聯(lián)用方法，用血藥濃度法測定高烏甲素在兔體內(nèi)的藥動學(xué)參數(shù)。結(jié)果顯示，高烏甲素透皮吸收藥時曲線呈現(xiàn)明顯雙峰現(xiàn)象，高烏甲素凝膠在兔體

9、內(nèi)的藥動學(xué)模型近似一室模型，藥動學(xué)參數(shù)Tmax=3.0h，Cmax=189ng·L-1，AUC0-∞=1437.292ng·L-1·h-1，ke=0.155h-1，t1/2=4.460h。 最后，進行了高烏甲素凝膠劑初步藥效學(xué)研究。采用小鼠醋酸扭體試驗、小鼠甲醛致痛試驗及小鼠熱板法鎮(zhèn)痛試驗研究高烏甲素凝膠的鎮(zhèn)痛作用，采用蛋清致大鼠足腫脹試驗、二甲苯致小鼠耳腫脹試驗研究高烏甲素凝膠的抗炎、消腫作用，并且通過測定大鼠不同腦區(qū)β-內(nèi)啡