

版權(quán)說(shuō)明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡(jiǎn)介
1、目的:觀察HBV轉(zhuǎn)基因小鼠急性肝損傷過(guò)程中肝臟PD-1、PD-L1、ICOS、ICOSL及血清中IL-4、IL-2、IFN-γ的動(dòng)態(tài)變化情況,初步探討HBV轉(zhuǎn)基因小鼠在急性肝損傷的免疫變化機(jī)制。
方法:選取20只健康雄性C57BL/6小鼠作為正常對(duì)照組(A組),20只健康雄性C57BL/6小鼠作為四氯化碳(CCL4)干預(yù)組(B組),20只雄性HBsAg表達(dá)陰性的轉(zhuǎn)基因小鼠為轉(zhuǎn)基因HBsAg陰性CCL4干預(yù)組(C組),20只雄性
2、HBsAg表達(dá)陽(yáng)性轉(zhuǎn)基因小鼠為轉(zhuǎn)基因HBsAg陽(yáng)性CCL4干預(yù)組(D組),B、C、D組制作急性肝損傷模型,A組按0.5ml?kg-1腹腔注射橄欖油溶液,于0h、24h、48h、72h四個(gè)時(shí)間點(diǎn)取標(biāo)本。B、C、D每組各留5只作為空白對(duì)照,均按0.5ml?kg-1腹腔注射橄欖油溶液,0h處死,其余15只各自隨機(jī)分組,一次性給予0.5ml?kg-1腹腔注射10%CCL4橄欖油溶液,分別于24h、48h、72h每組隨機(jī)挑選5只小鼠,采集標(biāo)本,血
3、清測(cè)定AST、ALT、ALP、TP、ALB、IL-4、IL-2、IFN-γ,同時(shí)取出肝臟,部分標(biāo)本行HE染色及免疫組化,部分用于RT-qPCR方法鑒定肝臟中的PD-1、PD-L1、ICOS、ICOSL的表達(dá)情況。
結(jié)果:1、生化檢測(cè):24h,B組與A組比較,AST、ALT水平顯著升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);B組和D組迅速達(dá)到高峰,與 C組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。48h,C組達(dá)到峰值,但B組AST、ALT已
4、經(jīng)慢慢下降,與C組、D組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。2、病理學(xué)觀察:24h,B組與A組比較已有明顯病理改變。B、C、D組均出現(xiàn)廣泛的肝細(xì)胞變性,壞死輕微,肝小葉內(nèi)可有散在的點(diǎn)狀壞死,以胞漿疏松化和氣球樣變最為普遍;48h,C組病變最嚴(yán)重,出現(xiàn)彌漫性的大片壞死;72h,B、C、D組均有片狀壞死及大片的肝細(xì)胞胞漿疏松化及脂肪空泡,小葉內(nèi)及匯管區(qū)有大量淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞為主的炎細(xì)胞浸潤(rùn),但C組的病變最嚴(yán)重。3、免疫組化:B組48h
5、 ICOS、ICOSL高表達(dá),72h又表達(dá)了PD-L1;C組PD-1從24h至72h一直持續(xù)高表達(dá),ICOS24h高表達(dá),PD-L148h以后持續(xù)高表達(dá);D組72hPD-1、ICOSL高表達(dá)。4、RT-qPCR:B組ICOS24h至72h一直高表達(dá),PD-124h高表達(dá);C組PD-1從24h至72h一直持續(xù)高表達(dá),ICOS24h高表達(dá),ICOSL48h高表達(dá);D組72h ICOSL高表達(dá)。5、CBA:B、C、D組動(dòng)物IL-2在0h D組
6、高表達(dá),24h C組升高顯著,48hB、C組繼續(xù)升高,而D組迅速下降,與B、C組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。B組IL-248h達(dá)到峰值,72h迅速下降。C組24h開(kāi)始升高,48h達(dá)到峰值,72h迅速下降。B、C、D組動(dòng)物IFN-γ在0h B組高表達(dá),24h B、D組表達(dá)升高,但C組仍保持高表達(dá),48h B、C組繼續(xù)升高,而D組迅速下降,72h B、C組均降低,而D組升高與B、C組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。B組IFN-γ表達(dá)
7、在24h開(kāi)始升高,48h達(dá)到峰值,72h迅速下降。C組0h、24h、48h始終高表達(dá),72h迅速下降。D組48h降低,與0h、24h、72h比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。B、C、D組動(dòng)物IL-4在0h B組與C、D組有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,24h三組IL-4表達(dá)均升高,48h B、C組繼續(xù)升高,而D組迅速下降,72h B、C組迅速降低,而D組升高與B、C組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。在B組、C組24h IL-4表達(dá)開(kāi)始升高,48h達(dá)到峰
8、值,72h迅速下降。D組24h IL-4表達(dá)開(kāi)始升高,48h降到最低,72h迅速上升。
結(jié)論:HBV轉(zhuǎn)基因小鼠24h即可出現(xiàn)急性肝損傷,尤其是HBsAg表達(dá)陰性的轉(zhuǎn)基因小鼠損傷比陽(yáng)性小鼠更嚴(yán)重。正常小鼠和轉(zhuǎn)基因HBsAg陰性小鼠受到刺激 PD-1、PD-L1、ICOS、ICOSL及血清中 IL-4、IL-2、IFN-γ均升高,發(fā)生強(qiáng)烈的免疫反應(yīng),而轉(zhuǎn)基因HBsAg陽(yáng)性小鼠組免疫分子一直表達(dá)較低,其可能原因是在受到長(zhǎng)期 HBsA
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無(wú)特殊說(shuō)明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁(yè)內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒(méi)有圖紙預(yù)覽就沒(méi)有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫(kù)僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- ICOS-ICOSL和PD-1-PD-L1共刺激分子在骨性關(guān)節(jié)炎滑膜損傷中變化情況的研究.pdf
- PD-1-PD-L1通路在HBV感染中作用的研究.pdf
- 共刺激分子配體PD-L1、PD-L2的真核表達(dá)及其轉(zhuǎn)基因小鼠的制備.pdf
- PD-1-PD-L1信號(hào)通路對(duì)小鼠脊髓損傷修復(fù)的影響.pdf
- pd-1-pd-l1單抗抗腫瘤藥應(yīng)用
- 腎移植受者PD-1-PD-L1信號(hào)通路在基礎(chǔ)和臨床研究.pdf
- PD-1-PD-L1在胃癌中的表達(dá)及其臨床意義的相關(guān)研究.pdf
- 負(fù)性共刺激分子PD-1-PD-L1在系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者外周血的表達(dá)及其臨床意義.pdf
- 可溶性PD-1和PD-L1分子對(duì)PD-1-PD-L1途徑的調(diào)節(jié)作用及其生物學(xué)意義.pdf
- PD-1-PD-L1信號(hào)通路在肺癌中對(duì)Treg細(xì)胞的調(diào)節(jié)作用.pdf
- HBV相關(guān)肝損害患者Th17、Treg和CD8+T細(xì)胞上PD-1-PD-L1的表達(dá)及意義.pdf
- 阻斷PD-1-PD-L1信號(hào)通路對(duì)負(fù)載HBsAg的DC疫苗抗HBV免疫功能的影響.pdf
- 鼻咽癌組織中PD-1-PD-L1的表達(dá)及臨床意義.pdf
- PD-1-PD-L1在食管鱗癌組織中的表達(dá)及其對(duì)食管鱗癌預(yù)后的影響.pdf
- PD-1-PD-L1途徑在膿毒癥T淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞中的作用及機(jī)制研究.pdf
- 大鼠腎移植急性排斥中PD-L1-PD-1表達(dá)的研究.pdf
- PD-1-PD-L1信號(hào)通路與Treg-Th17免疫失衡在子癇前期發(fā)病機(jī)制中的研究.pdf
- PD-1-PD-L1通路在原發(fā)性膽汁性膽管炎免疫機(jī)制中的作用.pdf
- 肺結(jié)核患者外周淋巴細(xì)胞亞群及協(xié)同刺激分子PD-1-PD-L1的表達(dá)特性與生物學(xué)意義.pdf
- 艾灸調(diào)控實(shí)驗(yàn)性RA模型T細(xì)胞功能的PD-1-PD-L1機(jī)制研究.pdf
評(píng)論
0/150
提交評(píng)論