α-芋螺毒素TeA21與LiC22氧化折疊及其活性研究.pdf

1、α-家族芋螺毒素能選擇性阻斷nAChRs的某種亞型，是一類鑒定nAChRs 及其亞基的有效工具。海南產(chǎn)α-CTX的研究才剛起步，絕大多數(shù)α-芋螺毒素尚未被發(fā)現(xiàn)和研究，因此研究與開發(fā)新的α-CTX具有重要意義。 本研究中，α-芋螺毒素TeA21和LiC22分別來源于海南產(chǎn)的織錦芋螺(Conustextile Linnaeus)和疣蒿芋螺(Conus lividus Hwass)。首先，我們通過固相合成法合成芋螺毒素TeA21，采用

2、Fmoc基團保護α-氨基酸，當多肽完全合成后，使用溶液K把多肽從樹脂上裂解下來，然后用HPLC純化。電噴霧質(zhì)譜法鑒定合成后的芋螺毒素TeA21分子量，結(jié)果顯示合成的芋螺毒素TeA21分子量為1895.9，與理論分子量一致，表明芋螺毒素TeA21的線性肽被合成成功。 本文還研究了α-芋螺毒素TeA21和LiC22的氧化折疊，特別是哪些因素能夠促進芋螺毒素的氧化折疊以及影響其過程。折疊反應(yīng)中都含有一定濃度的折疊緩沖液和線性芋螺毒素。

3、我們選擇了四種不同的反應(yīng)緩沖液(濃度為0.1M)MOPS-NaOH、Trds-HCl、Gly-NaOH 和 NH<,4>HCO<,3>，并用分析型HPLC檢測芋螺毒素TeA21的氧化折疊過程和反應(yīng)結(jié)果。結(jié)果表明Tris-HC1效果相對較好。在研究中，我們發(fā)現(xiàn)氧化還原試劑如氧化態(tài)谷胱甘肽和還原態(tài)谷胱甘肽對線性芋螺毒素氧化折疊非常重要，而溫度對α芋螺毒素TeA21和LiC22天然產(chǎn)物產(chǎn)率影響并不明顯。在折疊混合物中加入有機助溶劑，如甲醇、乙