甲基強(qiáng)的松龍對脊髓損傷后卵磷脂膽固醇脂酰轉(zhuǎn)移酶、甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶基因的表達(dá)影響.pdf

1、隨著現(xiàn)代交通和工業(yè)的發(fā)展，脊髓損傷(spinal cord injury，SCI)的發(fā)生也呈逐年增加趨勢。脊髓損傷除包括致傷因素造成的原發(fā)性損傷外，更重要的是損傷后繼發(fā)性病理生理改變所造成的繼發(fā)性損傷。因此，如何減少或預(yù)防繼發(fā)性損傷進(jìn)而促進(jìn)損傷脊髓結(jié)構(gòu)及功能的重建是基礎(chǔ)研究的熱點(diǎn)問題。 目前對繼發(fā)性脊髓損傷中的一些分子和細(xì)胞的變化機(jī)制還未完全闡明。但大量證據(jù)證明了，脊髓損傷早期產(chǎn)生的自由基及脂質(zhì)過氧化反應(yīng)即是繼發(fā)病理損害發(fā)生的主

2、要因素。卵磷脂膽固醇脂酰轉(zhuǎn)移酶可促進(jìn)組織、細(xì)胞內(nèi)膽固醇的清除、維持細(xì)胞膽固醇穩(wěn)態(tài)，在磷脂代謝中有重要的作用。 神經(jīng)細(xì)胞損傷后，在局部可引起炎癥反應(yīng)，趨化因子吸引更多的炎癥細(xì)胞以及小膠質(zhì)細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞的激活和聚集。這有利于清除死亡組織及細(xì)胞碎屑為神經(jīng)再生創(chuàng)造條件；但同時由于活化的小膠質(zhì)細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞的增多，導(dǎo)致過度膠質(zhì)化，局部形成膠質(zhì)瘢痕，成為軸突再生的一個機(jī)械屏障。甘氨酸脯氨酸二肽氨基肽酶能特異地水解N-2末端為甘氨酰-

3、脯氨酰的肽鍵，而膠質(zhì)瘢痕中恰恰富含這種結(jié)構(gòu)成份，因此推測甘氨酸脯氨酸二肽氨基肽酶在膠原肽的降解中起到作用。 人們對急性脊髓損傷的藥物治療進(jìn)行了研究。經(jīng)過大量臨床研究表明，大劑量甲基強(qiáng)的松龍療法被作為是急性脊髓損傷的標(biāo)準(zhǔn)治療方案。 本文對脊髓損傷早期后卵磷脂膽固醇脂酰轉(zhuǎn)移酶和甘氨酸脯氨酸二肽氨基肽酶2個基因的表達(dá)變化進(jìn)行研究，并探討早期應(yīng)用甲基強(qiáng)的松龍對其基因表達(dá)的影響。分為2個部分。 第一部分甲基強(qiáng)的松龍對脊髓損

4、傷后LCAT基因表達(dá)的影響 目的: 研究甲基強(qiáng)的松龍對脊髓損傷后卵磷脂膽固醇脂酰轉(zhuǎn)移酶基因表達(dá)的影響。 方法: SD大鼠30只，體重200～250 g，雌雄不拘。隨機(jī)分為假手術(shù)組、單純脊髓損傷組(損傷組)、脊髓損傷+大劑量甲基強(qiáng)的松龍組(甲基強(qiáng)的松龍組)。每組10只。損傷后24小時將損傷平面上下0.5cm的脊髓組織切取，進(jìn)行RT-PCR反應(yīng)。 結(jié)果: 假手術(shù)組在術(shù)后24小時LCATmRNA

5、的表達(dá)的相對豐度為0.6743±0.0043，損傷組在傷后24小時LCATmRNA的表達(dá)的相對豐度降至0.0589±0.0281，差異有非常顯著性(P<0.01)。甲基強(qiáng)的松龍組在傷后24小時LCATmRNA的表達(dá)的相對豐度為0.7036±0.2225，與損傷組比較差異有顯著性(P<0.01.)。 結(jié)論: 大劑量甲基強(qiáng)的松龍能促進(jìn)LCAT的表達(dá)，發(fā)揮保護(hù)作用，減少脊髓繼發(fā)損傷。 第二部分脊髓損傷早期甘氨酸脯氨酸二

6、肽氨基肽酶表達(dá)及甲基強(qiáng)的松龍對其表達(dá)的影響 目的： 研究脊髓損傷后甘氨酸脯氨酸二肽氨基肽酶的基因表達(dá)，并探討甲基強(qiáng)的松龍對其表達(dá)的影響。 方法： SD大鼠30只。隨機(jī)分為假手術(shù)組、單純脊髓損傷組(損傷組)、脊髓損傷+大劑量甲基強(qiáng)的松龍組(甲基強(qiáng)的松龍組)。應(yīng)用改良的Allen打擊法致T8脊髓損傷。甲基強(qiáng)的松龍組大鼠尾靜脈內(nèi)注射大劑量甲基強(qiáng)的松龍(30mg/kg)。損傷后24小時將損傷平面上下0.5cm的脊

7、髓組織切取，進(jìn)行RT-PCR反應(yīng)。檢測甘氨酸脯氨酸二肽氨基肽酶的基因表達(dá)。 結(jié)果： 假手術(shù)組在術(shù)后24小時甘氨酸脯氨酸二肽氨基肽酶mRNA的表達(dá)的相對豐度為1.5809±0.1554，損傷組在傷后24小時甘氨酸脯氨酸二肽氨基肽酶的表達(dá)的相對豐度下降為0.6605±0.3366，是假手術(shù)組1/2倍，差異有非常顯著性(p<0.01)。甲基強(qiáng)的松龍組在傷后24小時甘氨酸脯氨酸二肽氨基肽酶mRNA的表達(dá)的相對豐度明顯升高為1.8