甲基強的松龍對脊髓損傷后卵磷脂膽固醇脂酰轉(zhuǎn)移酶、甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶基因的表達影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、隨著現(xiàn)代交通和工業(yè)的發(fā)展,脊髓損傷(spinal cord injury,SCI)的發(fā)生也呈逐年增加趨勢。脊髓損傷除包括致傷因素造成的原發(fā)性損傷外,更重要的是損傷后繼發(fā)性病理生理改變所造成的繼發(fā)性損傷。因此,如何減少或預防繼發(fā)性損傷進而促進損傷脊髓結構及功能的重建是基礎研究的熱點問題。 目前對繼發(fā)性脊髓損傷中的一些分子和細胞的變化機制還未完全闡明。但大量證據(jù)證明了,脊髓損傷早期產(chǎn)生的自由基及脂質(zhì)過氧化反應即是繼發(fā)病理損害發(fā)生的主

2、要因素。卵磷脂膽固醇脂酰轉(zhuǎn)移酶可促進組織、細胞內(nèi)膽固醇的清除、維持細胞膽固醇穩(wěn)態(tài),在磷脂代謝中有重要的作用。 神經(jīng)細胞損傷后,在局部可引起炎癥反應,趨化因子吸引更多的炎癥細胞以及小膠質(zhì)細胞、星形膠質(zhì)細胞的激活和聚集。這有利于清除死亡組織及細胞碎屑為神經(jīng)再生創(chuàng)造條件;但同時由于活化的小膠質(zhì)細胞、星形膠質(zhì)細胞的增多,導致過度膠質(zhì)化,局部形成膠質(zhì)瘢痕,成為軸突再生的一個機械屏障。甘氨酸脯氨酸二肽氨基肽酶能特異地水解N-2末端為甘氨酰-

3、脯氨酰的肽鍵,而膠質(zhì)瘢痕中恰恰富含這種結構成份,因此推測甘氨酸脯氨酸二肽氨基肽酶在膠原肽的降解中起到作用。 人們對急性脊髓損傷的藥物治療進行了研究。經(jīng)過大量臨床研究表明,大劑量甲基強的松龍療法被作為是急性脊髓損傷的標準治療方案。 本文對脊髓損傷早期后卵磷脂膽固醇脂酰轉(zhuǎn)移酶和甘氨酸脯氨酸二肽氨基肽酶2個基因的表達變化進行研究,并探討早期應用甲基強的松龍對其基因表達的影響。分為2個部分。 第一部分甲基強的松龍對脊髓損

4、傷后LCAT基因表達的影響 目的: 研究甲基強的松龍對脊髓損傷后卵磷脂膽固醇脂酰轉(zhuǎn)移酶基因表達的影響。 方法: SD大鼠30只,體重200~250 g,雌雄不拘。隨機分為假手術組、單純脊髓損傷組(損傷組)、脊髓損傷+大劑量甲基強的松龍組(甲基強的松龍組)。每組10只。損傷后24小時將損傷平面上下0.5cm的脊髓組織切取,進行RT-PCR反應。 結果: 假手術組在術后24小時LCATmRNA

5、的表達的相對豐度為0.6743±0.0043,損傷組在傷后24小時LCATmRNA的表達的相對豐度降至0.0589±0.0281,差異有非常顯著性(P<0.01)。甲基強的松龍組在傷后24小時LCATmRNA的表達的相對豐度為0.7036±0.2225,與損傷組比較差異有顯著性(P<0.01.)。 結論: 大劑量甲基強的松龍能促進LCAT的表達,發(fā)揮保護作用,減少脊髓繼發(fā)損傷。 第二部分脊髓損傷早期甘氨酸脯氨酸二

6、肽氨基肽酶表達及甲基強的松龍對其表達的影響 目的: 研究脊髓損傷后甘氨酸脯氨酸二肽氨基肽酶的基因表達,并探討甲基強的松龍對其表達的影響。 方法: SD大鼠30只。隨機分為假手術組、單純脊髓損傷組(損傷組)、脊髓損傷+大劑量甲基強的松龍組(甲基強的松龍組)。應用改良的Allen打擊法致T8脊髓損傷。甲基強的松龍組大鼠尾靜脈內(nèi)注射大劑量甲基強的松龍(30mg/kg)。損傷后24小時將損傷平面上下0.5cm的脊

7、髓組織切取,進行RT-PCR反應。檢測甘氨酸脯氨酸二肽氨基肽酶的基因表達。 結果: 假手術組在術后24小時甘氨酸脯氨酸二肽氨基肽酶mRNA的表達的相對豐度為1.5809±0.1554,損傷組在傷后24小時甘氨酸脯氨酸二肽氨基肽酶的表達的相對豐度下降為0.6605±0.3366,是假手術組1/2倍,差異有非常顯著性(p<0.01)。甲基強的松龍組在傷后24小時甘氨酸脯氨酸二肽氨基肽酶mRNA的表達的相對豐度明顯升高為1.8

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