非諾貝特抑制組織因子表達和全血TiFaCT法在血栓性疾病中的初步應(yīng)用.pdf

1、目的：構(gòu)建單核細胞組織因子（TF）mRNA誘導(dǎo)表達的細胞研究模型，探討非諾貝特對脂多糖（LPS）誘導(dǎo)的TF表達和促凝血活性（PCA）的影響；初步探討全血組織因子凝血時間法（TiFaCT）測定全血TF-PCA在血栓性疾病中的應(yīng)用。 方法: 使用不同濃度的脂多糖（LPS）觀察不同時間點單核細胞株THP-1的TFmRNA表達情況，以構(gòu)建TFmRNA誘導(dǎo)表達的細胞模型。分別用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)、流式細胞術(shù)(FCM)和TF

2、凝血時間法（TiFaCT）檢測非諾貝特對LPS刺激下THP-1的TFmRNA含量、TF蛋白表達水平和TF-PCA的影響。使用全血TiFaCT法測定健康人及血栓性疾病病人的基礎(chǔ)狀態(tài)TF-PCA和LPS刺激后的TF-PCA。 結(jié)果： 1.研究單核細胞TFmRNA誘導(dǎo)表達的實驗?zāi)Ｐ妥饔脳l件為10μg/ml LPS作用3h。非諾貝特抑制LPS誘導(dǎo)下THP-1細胞的TFmRNA合成增加、TF蛋白表達上調(diào)和TF-PCA的增強，其抑制

3、率分別達到LPS組的66％、47％和29％（P＜0.05）。50μmol/L的非諾貝特即可明顯抑制LPS誘導(dǎo)的TF-PCA。非諾貝特單獨使用不影響基礎(chǔ)水平TF-PCA。 2.使用全血TiFaCT法測得血栓性疾病病人的基礎(chǔ)水平TF-PCA和LPS刺激下TF-PCA分別為(1.33±0.53) 任意單位（AU）和(9.42±4.79)AU，明顯高于正常對照組的(0.31±0.29) AU和(1.59±1.26) AU。伴發(fā)彌散性血管

4、內(nèi)凝血（DIC）的血栓性疾病病人LPS誘導(dǎo)的全血TF-PCA明顯高于未伴發(fā)DIC組。 結(jié)論： 1.建立了研究單核細胞TFmRNA表達的細胞實驗?zāi)Ｐ汀?2.非諾貝特明顯抑制TF表達和活性，在不影響基礎(chǔ)TF-PCA的情況下能有效抑制LPS誘導(dǎo)下的TF-PCA，推測具有較好的抗栓應(yīng)用前景。 3.使用全血TiFaCT法測定血栓性疾病病人全血TF-PCA的結(jié)果顯示血栓性疾病病人基礎(chǔ)水平和LPS刺激后的全血TF-PC