三氧化二砷逆轉(zhuǎn)肝癌細(xì)胞株HepG2-ADM多藥耐藥作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的： 探討三氧化二砷(As<,2>O<,3>)體外逆轉(zhuǎn)人肝癌細(xì)胞多藥耐藥性的作用及機(jī)制。 方法： MTT法檢測As<,2>O<,3>對HepG2，HepG2/ADM的細(xì)胞毒作用和處理前后HepG2/ADM細(xì)胞對化療藥物的敏感性，用流式細(xì)胞儀檢測HepG2/ADM細(xì)胞內(nèi)阿霉素濃度，通過RT-RCR檢測mdrl基因的表達(dá)。 結(jié)果： 1．As<,2>O<,3>對HepG2，HepG2/ADM細(xì)胞毒性檢

2、測。結(jié)果顯示As<,2>O<,3>在0.25 mg/L時對HepG2，HepG2/ADM細(xì)胞無明顯毒性，超過此濃度呈劑量效應(yīng)關(guān)系，As<,2>O<,3>對HepG2，HepG2/ADM的IC<,50>分別為1.02mg/L，1.34mg/L2．As<,2>O<,3>能夠提高細(xì)胞對抗癌藥的敏感性。使用0.2 mg/L濃度As<,2>O<,3>后ADM，CDDP，MMC和5-FU對HepG2，HepG2/ADM的IC<,50>明顯降低。As

3、<,2>O<,3>對HepG2/ADM不同化療藥物耐藥性的逆轉(zhuǎn)倍數(shù)分別為：ADM 2.92倍、CDDP 3.09倍、MMC2.13倍、5-FU 2.60倍3．As<,2>O<,3>能夠提高HepG2，HepG2/ADM細(xì)胞內(nèi)藥物濃度。實(shí)驗(yàn)組ADM與無細(xì)胞毒性的As<,2>O<,3>合用，與對照組單用ADM比較，細(xì)胞內(nèi)ADM的累積量明顯提高(P<0.01)。 4．As<,2>O<,3>能夠降低HepG2/ADM細(xì)胞PgP的表達(dá)。A

4、s<,2>O<,3>作用于HepG2/ADM細(xì)胞后，其Pgp表達(dá)(細(xì)胞內(nèi)平均熒光強(qiáng)度：5.65±0.03)較對照組PgP表達(dá)(細(xì)胞內(nèi)平均熒光強(qiáng)度：7.22±0.23)降低。 5．As<,2>O<,3>能夠降低HepG2/ADM細(xì)胞mdrl表達(dá)。RT-PCR結(jié)果顯示：HepG2細(xì)胞的mdrl表達(dá)明顯弱于HepG2/ADM細(xì)胞，且As<,2>O<,3>作用后無顯著變化；而HepG2/ADM經(jīng)0.2 mg/L As<,2>O<,3>作