高生物安全性內(nèi)皮抑素（endostatin）表達載體對卵巢癌模型抑制作用的動物實驗研究.pdf

1、目的:卵巢癌是婦科常見的惡性腫瘤之一,血管生成在卵巢癌的發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移中起重要作用.以腫瘤新生血管為靶點的抗腫瘤血管生成療法成為目前研究的熱點.內(nèi)皮抑素(endostatin)是近年來發(fā)現(xiàn)的一種內(nèi)源性血管內(nèi)皮細胞增殖的強效抑制劑,能特異性抑制處于增殖狀態(tài)的新生血管內(nèi)皮細胞,并伴有誘導凋亡的作用.本研究的目的是利用已構(gòu)建的高生物安全性的endostatin真核表達載體PVAX-sEn,通過在體外研究PVAX-sEn對人臍靜脈內(nèi)皮細胞及對

2、荷卵巢癌細胞裸鼠的抑制作用,為臨床上卵巢癌基因介入治療新方案的實施提供實驗依據(jù).方法:1、利用新型表皮皮生長因子受體(EGFR)介導的腫瘤細胞基因轉(zhuǎn)移系統(tǒng)-四元復合體介導PVAX-sEn轉(zhuǎn)染人卵巢癌細胞系3AO,72h收集細胞上清:2、利用四甲基偶氮唑鹽(MTT)法檢測PVAX-sEn轉(zhuǎn)染細胞上清對人臍靜脈細胞系ECV-204的抑制作用:3、采用3AO細胞給裸鼠腋下皮下接種制備卵巢癌移植瘤動物模型,利用四元復合體介導PVAX-sEn瘤內(nèi)

3、注射,5 μg/只鼠,每周2次,共4次,觀察其對卵巢癌生長的抑制作用.4、取瘤體利用流式細胞儀檢測PVAX-sEn基因轉(zhuǎn)染對腫瘤細胞細胞周期的影響.5、取瘤體利用免疫組化法檢測腫瘤微血管密度.6、取全身重要臟器進行病理檢測,觀察PVAX-sEn基因轉(zhuǎn)染對血管內(nèi)皮細胞的影響.結(jié)論:1、重組endostatin表達載體PVAX-sEn在體外可有效抑制人臍靜脈內(nèi)皮細胞系ECV一204的增殖.2、PVAX-sEn可有效抑制荷瘤裸鼠的生長,并可誘