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1、為了揭示雞包涵體肝炎(InclusBodyHepatitis,IBH)過(guò)程中肝臟內(nèi)的分子免疫機(jī)理,用禽腺病毒(FAV)Ⅷ型口服接種感染1日齡SPF雛雞,攻毒后不同日齡雛雞病變以急性壞死性肝炎為主。取不同日齡的肝臟制作冰凍切片(或于福爾馬林溶液中固定,進(jìn)行石蠟包埋、石蠟切片),應(yīng)用免疫組化技術(shù)檢測(cè)肝臟中K1+單核巨噬細(xì)胞、CD3+、CD4+和CD8+T淋巴細(xì)胞、Bu-1a+B淋巴細(xì)胞的變化規(guī)律;采用原位雜交技術(shù),檢測(cè)肝臟枯否氏細(xì)胞(kup
2、ffercell)、T、B淋巴細(xì)胞中的IL-2、IL-6、IFN-γ和MIP-1β的表達(dá)規(guī)律。原位雜交顯示:著染部位主要出現(xiàn)在壞死灶或血管周圍的成團(tuán)或散在的淋巴細(xì)胞的胞漿內(nèi),少數(shù)出現(xiàn)在枯否氏細(xì)胞的胞漿內(nèi)。IL-2、IL-6、IFN-γ和MIP-1β在3dpi內(nèi)表達(dá)不明顯,從5dpi表達(dá)量開(kāi)始增加,9dpi、12dpi基本達(dá)到高峰,以后逐漸下降。免疫組化顯示:K1+單核巨噬細(xì)胞3dpi開(kāi)始出現(xiàn),7~9dpi數(shù)量增多并達(dá)到高峰,12dpi有
3、所下降,15dpi又增多,之后數(shù)量逐漸減少。CD3+、CD4+和CD8+T淋巴細(xì)胞3~7dpi表達(dá)量普遍很少,之后逐漸增加,12dpi達(dá)到高峰,以后表達(dá)量又逐漸降低,30dpi基本消失。Bu-1a+B淋巴細(xì)胞3~5dpi少量表達(dá),之后表達(dá)量持續(xù)升高,15dpi達(dá)到高峰,以后表達(dá)量逐漸下降,30dpi仍有少量表達(dá)。說(shuō)明:雞包涵體肝炎過(guò)程中肝臟內(nèi)IL-2、IL-6、IFN-γ和MIP-1β的mRNA大量上調(diào),可能與單核巨噬細(xì)胞和T、B淋巴細(xì)
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