藤三七葉提取物對(duì)高果糖誘發(fā)的小鼠胰島素抵抗的影響及機(jī)制探討.pdf

1、目的:本研究旨在通過高果糖飼料誘發(fā)ICR小鼠胰島素抵抗，觀察藤三七葉類黃酮和皂甙提取物對(duì)小鼠胰島素抵抗的影響，并探討藤三七葉提取物的降糖機(jī)制。
　　方法:72只雄性ICR小鼠購(gòu)于大連醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，隨機(jī)分為6組，即對(duì)照組、模型組，低劑量類黃酮組、高劑量類黃酮組，低劑量皂甙組和高劑量皂甙組，每組12只。對(duì)照組小鼠食用正常飼料和飲用水;模型組小鼠食用60％果糖飼料和正常飲用水;低劑量類黃酮組小鼠食用60％果糖飼料和1％藤三七葉類

2、黃酮提取物飲液;高劑量類黃酮組小鼠食用60％果糖飼料和2％藤三七葉類黃酮提取物飲液;低劑量皂甙組小鼠食用60％果糖飼料和1％藤三七葉皂甙提取物飲液;高劑量皂甙組小鼠食用60％果糖飼料和2％藤三七葉皂甙提取物飲液。在第19周時(shí)進(jìn)行口服葡萄糖耐量試驗(yàn)(OGTT)，小鼠禁食12小時(shí)后，分別在0，30，60和120min時(shí)間點(diǎn)尾部靜脈取血，測(cè)試血糖濃度。第20周，小鼠稱重后，經(jīng)眼部穿刺取血獲取血清，頸椎脫臼法處死后，解剖獲得肝組織并稱重。通過小

3、鼠體重和肝臟重量，計(jì)算小鼠肝臟臟器系數(shù)，評(píng)價(jià)小鼠肝臟的損傷狀況;應(yīng)用自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)小鼠空腹血清中葡萄糖、甘油三酯、總膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇和高密度脂蛋白膽固醇的濃度;采用Western Blot免疫印記技術(shù)，檢測(cè)各組小鼠肝臟組織PPARγ蛋白的相對(duì)表達(dá)水平;采用實(shí)時(shí)熒光相對(duì)定量RT-PCR(qRT-PCR)技術(shù)，檢測(cè)各組小鼠肝組織中PPARγ基因的相對(duì)表達(dá)水平;小鼠肝臟組織經(jīng)HE染色后，在鏡下觀察各組小鼠肝臟的病理改變。實(shí)驗(yàn)結(jié)果

4、用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
　　結(jié)果:小鼠肝臟臟器系數(shù)結(jié)果顯示，模型組與對(duì)照組比較，小鼠肝臟發(fā)生了明顯的損傷，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）;低劑量類黃酮組、高劑量類黃酮組和模型組比較，小鼠肝臟臟器系數(shù)均無顯著性差異（P＞0.05）;高劑量皂甙組與模型組比較，小鼠肝臟損傷得到明顯改善，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。葡萄糖耐量實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，模型組與對(duì)照組比較，小鼠糖耐量明顯發(fā)生異常，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0

5、.05);低劑量類黃酮組和高劑量類黃酮組與模型組比較，小鼠糖耐量差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);低劑量皂甙組和高劑量皂甙組與模型組比較，明顯改善小鼠糖耐量異常，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，且呈劑量-效應(yīng)關(guān)系。模型組與對(duì)照組比較，小鼠空腹血清中葡萄糖、胰島素、甘油三酯、總膽固醇、和低密度脂蛋白膽固醇的濃度明顯升高，高密度脂蛋白膽固醇濃度下降，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);低劑量類黃酮組和高劑量類黃酮組與模型組比較，差異無

6、統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);低劑量皂甙組和高劑量皂甙組與模型組比較，差異具有顯著性差異（P＜0.05），且呈劑量-效應(yīng)關(guān)系。qRT-PCR檢測(cè)結(jié)果顯示，模型組與對(duì)照組比較，小鼠肝臟組織PPARγ mRNA表達(dá)顯著降低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）;低劑量類黃酮組和高劑量類黃酮組與模型組比較均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);低劑量皂甙組和高劑量皂甙組與模型組比較，PPARγ mRNA的表達(dá)顯著增高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），

7、且呈劑量-效應(yīng)關(guān)系。Western Blot檢測(cè)結(jié)果顯示，模型組與對(duì)照組比較，小鼠肝臟組織PPARγ蛋白表達(dá)顯著降低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）;低劑量類黃酮組和高劑量類黃酮組與模型組比較均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);低劑量皂甙組和高劑量皂甙組與模型組比較，小鼠PPARγ蛋白的表達(dá)顯著增高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，且呈劑量-效應(yīng)關(guān)系。HE染色后，鏡下觀察，對(duì)照組小鼠肝細(xì)胞狀態(tài)良好，肝組織結(jié)構(gòu)清晰可見，未見明顯病理改