苦瓜提取物對HepG2胰島素抵抗細(xì)胞的調(diào)節(jié)作用研究.pdf

1、肥胖和2型糖尿病是影響人類健康的主要非傳染性慢性疾病，胰島素抵抗是其重要特征。目前已有多種改善胰島素抵抗的化學(xué)合成藥物，但長期服用此類藥物會加速脂肪細(xì)胞的分化，引起體重增加。因此篩選安全且有效改善胰島素抵抗的食物或藥食同源食物具有重要意義?？喙希∕omordica charantiaL.）作為一種藥食同源的食品，其含有多種活性成分具有調(diào)脂降糖功效，可通過提取苦瓜的不同組分，研究其改善胰島素抵抗功效及其作用途徑的異同點(diǎn)。
　　本文以

2、粒度≤150μm的苦瓜凍干粉為原料，提取苦瓜醇提物、水提物、水提多糖、堿提多糖和皂苷，采用HepG2胰島素抵抗細(xì)胞模型，研究不同苦瓜提取物對胰島素抵抗的干預(yù)作用（模型建立期間和建立后）及其作用途徑。主要研究內(nèi)容及結(jié)果如下:
　　1.制備了不同的苦瓜凍干粉提取物并分析了其主要組成。結(jié)果表明:苦瓜水提多糖、堿提多糖和皂苷的純度分別為83.40％、84.80％和56.53％;苦瓜醇提物中多酚含量最高(3.34％);苦瓜水提物中蛋白含量最

3、高(1.77％)?？喙纤岫嗵呛蛪A提多糖均為雜多糖，含有β-型糖苷鍵和吡喃環(huán)，單糖均由L-鼠李糖、甘露糖、D-葡萄糖和L-半乳糖組成，摩爾比分別為16.81∶2.07∶1.00∶1.79和8.63∶0.65∶1.00∶0.33。
　　2.研究了HepG2胰島素抵抗細(xì)胞模型的建立方法及其穩(wěn)定性。結(jié)果表明:棕櫚酸的最佳誘導(dǎo)濃度和時間分別為0.15mM和12h，誘導(dǎo)后細(xì)胞葡萄糖消耗量顯著降低，產(chǎn)生胰島素抵抗;HepG2胰島素抵抗細(xì)胞模型

4、建立后，穩(wěn)定時間至少為48h。
　　3.采用HepG2胰島素抵抗模型，研究了苦瓜提取物對模型細(xì)胞糖脂代謝的調(diào)節(jié)作用。結(jié)果顯示，苦瓜醇提物、水提物、堿提多糖和皂苷均能有效的改善胰島素抵抗細(xì)胞的糖脂代謝;其中苦瓜堿提多糖和皂苷增加細(xì)胞葡萄糖消耗量的效果最為顯著，與二甲雙胍相當(dāng);750μg/mL苦瓜堿提多糖和250μg/mL苦瓜皂苷增加細(xì)胞內(nèi)糖原含量的效果最優(yōu);各組苦瓜提取物均能顯著降低甘油三酯含量(p＜0.05)，抑制脂質(zhì)積累。

5、>　　4.研究了不同苦瓜組分對HepG2胰島素抵抗細(xì)胞的能量代謝和抗氧化水平的影響。結(jié)果表明:后期和中期干預(yù)試驗(yàn)中苦瓜醇提物、皂苷和堿提多糖均能顯著增加細(xì)胞的ATP含量，且苦瓜水提物對模型細(xì)胞的中期干預(yù)效果優(yōu)于后期;苦瓜醇提物、水提物、皂苷和堿提多糖均能顯著降低模型細(xì)胞ROS（活性氧）含量(p＜0.05)，且堿提多糖的效果最優(yōu)。說明苦瓜提取物能促進(jìn)HepG2胰島素抵抗細(xì)胞的能量代謝，減輕氧化應(yīng)激。
　　5.研究了不同苦瓜組分改善H

6、epG2胰島素抵抗細(xì)胞的作用途徑。結(jié)果表明:苦瓜醇提物、水提物、堿提多糖和皂苷均能激活I(lǐng)RS1-PI3K-AKT（胰島素受體底物1-磷脂酰肌醇3激酶-蛋白激酶B）和AMPK-ACC2-CPT1（腺苷酸活化蛋白激酶-乙酰輔酶A羥化酶2-肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶1）信號通路，上調(diào)PGC-1α（過氧化物酶體增殖活化受體γ共激活因子-1α）和GLUT4（葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4）mRNA的表達(dá)水平，下調(diào)PEPCK（磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶）和JKN1(c-Ju