七氟烷對(duì)新生大鼠神經(jīng)系統(tǒng)影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、背景：
　　每年全世界數(shù)百萬(wàn)嬰幼兒接受全身麻醉和手術(shù)，但全身麻醉藥對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)處于突觸爆發(fā)期的兒童智力是否有影響，還不清楚。新生動(dòng)物使用全身麻醉藥麻醉后會(huì)出現(xiàn)多個(gè)腦區(qū)神經(jīng)細(xì)胞凋亡、突觸發(fā)育的異常和神經(jīng)退行性變，有些在成年后還會(huì)遺留神經(jīng)認(rèn)知或社交方面的障礙，其具體機(jī)制還不清楚。
　　目的：
　　通過(guò)實(shí)驗(yàn)研究七氟烷對(duì)核糖體蛋白S6的影響及其對(duì)其上下游通路的信號(hào)分子的影響，以研究七氟烷對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)作用的機(jī)制。
　　方法：<

2、br>　　建立新生動(dòng)物七氟烷吸入麻醉模型。選用P8的SD大鼠隨機(jī)分為兩組，麻醉組和氧氣對(duì)照組。以70％氧氣空氣混合氣為載氣，麻醉組大鼠給予七氟烷麻醉，分別在0.5h，1h，2h，4h取樣，當(dāng)麻醉持續(xù)4h后停止麻醉，將鼠仔放回母親身邊，并于放回后0.5h和2h分別取樣。另一組是氧氣對(duì)照組，直接使用70％空氣氧氣混合氣吸入。并在相同時(shí)間點(diǎn)取樣。一方面，取出新生大鼠的海馬和皮層組織，抽提蛋白行蛋白印跡實(shí)驗(yàn)，進(jìn)行Caspase-3，rpS6，p

3、-rpS6，AKT，p-AKT，mTOR，p-mTOR，ERK，p-ERK，JNK，p-JNK，P38，p-P38檢測(cè)，以actin為內(nèi)參。另一方面將新生大鼠從左心室灌流，取腦切片，行免疫組化實(shí)驗(yàn)，檢測(cè)Caspase-3和p-rpS6的表達(dá)分部狀況。此外，七氟烷麻醉4h和氧氣對(duì)照4h的新生大鼠剝?nèi)『ｑR和皮層，抽提RNA后送樣進(jìn)行基因芯片檢測(cè)，觀察七氟烷新生動(dòng)物麻醉對(duì)海馬和皮層基因表達(dá)的影響。
　　結(jié)果：
　　七氟烷新生動(dòng)物麻

4、醉4h后，在海馬和皮層均可見(jiàn)Caspase-3的表達(dá)上調(diào);給予新生大鼠七氟烷持續(xù)麻醉，會(huì)造成大腦皮層和CA1區(qū)明顯時(shí)間依賴性rpS6磷酸化的抑制;七氟烷能明顯抑制大腦皮層和海馬區(qū)的AKT活性，但對(duì)AKT的下游的mTOR沒(méi)有影響;七氟烷對(duì)海馬和大腦皮層的ERK活性產(chǎn)生了比較矛盾的效應(yīng);七氟烷增加了皮層和海馬的PP1的活性;基因芯片提示七氟烷麻醉對(duì)多種基因的表達(dá)產(chǎn)生了上調(diào)或下調(diào)的效應(yīng)，這些基因中許多是由于神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育，認(rèn)知記憶密切相關(guān)的基因