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文檔簡介
1、第一部分:通心絡(luò)對異丙腎上腺素誘導(dǎo)的H9c2心肌細(xì)胞肥大及Cx43mRNA表達(dá)的影響
目的:觀察通心絡(luò)超細(xì)干粉水提物對異丙腎上腺素(Isoproterenol, Iso)誘導(dǎo)的H9c2心肌細(xì)胞肥大的作用,并探討其對縫隙連接蛋白43(connexin43, Cx43)mRNA表達(dá)的影響。
方法:將培養(yǎng)的H9c2心肌細(xì)胞隨機分為對照組、TXL組、Iso組和Iso+TXL組,通心絡(luò)以通心絡(luò)超細(xì)干粉水提物的形式加入,用Iso
2、誘導(dǎo)72h后,采用相差顯微鏡測量細(xì)胞大小,BCA法測定細(xì)胞總蛋白濃度,逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)測定Cx43mRNA的表達(dá)。
結(jié)果:Iso刺激H9c2心肌細(xì)胞72小時后,Iso組細(xì)胞直徑增大,總蛋白濃度升高,明顯高于對照組(P<0.05);通心絡(luò)對正常H9c2心肌細(xì)胞直徑,總蛋白濃度無明顯影響,但能抑制Iso誘導(dǎo)的細(xì)胞直徑增大及總蛋白濃度升高(P<0.05)。Iso組Cx43mRNA表達(dá)明顯減少,低于對照組(P<0.
3、05);通心絡(luò)對正常H9c2心肌細(xì)胞Cx43mRNA表達(dá)無影響,但能夠抑制Iso誘導(dǎo)的Cx43 mRNA表達(dá)的下調(diào)(P<0.05)。
結(jié)論:通心絡(luò)可以抑制Iso誘導(dǎo)的H9c2心肌細(xì)胞肥大及Cx43mRNA表達(dá)的下調(diào)。
第二部分:通心絡(luò)改善肥厚心肌大鼠QT離散度及縫隙連接蛋白43的重構(gòu)
目的:觀察通心絡(luò)對壓力負(fù)荷誘導(dǎo)的心肌肥厚大鼠QT離散度和縫隙連接蛋白43重構(gòu)的干預(yù)作用。
方法:將45只雄性SD大
4、鼠隨機分為假手術(shù)組(sham-operation, SO)15只,腹主動脈縮窄組(abdominal aorta constriction, AC)15只,腹主動脈縮窄+通心絡(luò)組(AT)15只。腹主動脈縮窄法建立心肌肥厚模型,經(jīng)通心絡(luò)治療12周后,應(yīng)用超聲心動圖測定心肌肥厚程度,心臟電生理記錄儀測定大鼠QT離散度,HE染色觀察左室組織病理形態(tài)變化,免疫組織化學(xué)法觀察左室心肌Cx43的表達(dá)及分布,RT-PCR測定左室心肌Cx43mRNA的
5、表達(dá)。
結(jié)果:(1)超聲心動圖測量參數(shù)比較:與AT組和SO組比較,AC組 LVPWs、LVPWd、IVSs及IVSd均顯著增高(P<0.05);AT組和SO組之間比較,測量參數(shù)無顯著差異。(2) QT離散度比較:與AT組和SO組比較,AC組明顯延長(P<0.05);AT組和SO組間比較,QT離散度無顯著差異。(3)HE染色、心肌細(xì)胞橫徑(TDM)及左室相對質(zhì)量(LVW/BW)比較:與AT組和SO組比較,AC組心肌細(xì)胞明顯肥大、
6、排列紊亂,TDM及LVW/BW明顯增加(P<0.05);AT組和SO組相比,心肌細(xì)胞無明顯肥大、排列規(guī)則,TDM及LVW/BW無明顯改變。(4)免疫組化:與AT組和SO組比較,AC組Cx43表達(dá)明顯減少(P<0.05),分布紊亂;AT組和SO組比較,Cx43表達(dá)及分布無顯著差異。(5)RT-PCR:與AT組和SO組比較,AC組Cx43mRNA表達(dá)明顯減少(P<0.05);AT組和SO組比較,Cx43mRNA表達(dá)無顯著差異。
結(jié)
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