腸道不同層次對合縫合與支架法吻合的動物實驗研究.pdf

1、目的:研究大鼠腸道壁的不同層次之間互相對合縫合與捆綁式支架法吻合是否安全可行，其腸道吻合口愈合結(jié)果有無差異;采用捆綁式支架法腸吻合有無優(yōu)勢。
　　方法:以SD大鼠為研究對象，隨機(jī)分為5組，每組24只大鼠，觀察4個不同的時間點(diǎn)（術(shù)后3天、7天、14天、30天），每個時間點(diǎn)6只大鼠，采用不同層次對合縫合（漿膜層與漿膜層對合縫合SM vs SM組、粘膜層與粘膜層對合縫合MMvs MM組、漿膜層與粘膜層對合縫合SM vs MM組）、相同層

2、次對合縫合（單純縫合吻合Control組）以及捆綁式支架法吻合（Stent組）的方式，行大鼠小腸端端吻合術(shù)，對比各組吻合方式所需的縫合或吻合時間，術(shù)后一般狀況，術(shù)后腹腔粘連評分，術(shù)后各個觀測點(diǎn)吻合口的大體愈合情況，包含吻合口腸段的造影結(jié)果，吻合口爆破壓，羥脯氨酸含量，吻合口HE染色、Masson染色以及TGF-β1、b-FGF、α-SMA的免疫組化染色，TGF-β1、b-FGF、α-SMA的mRNA的表達(dá)量的RT-PCR測定等，通過統(tǒng)計

3、學(xué)數(shù)據(jù)分析結(jié)果，得出結(jié)論。
　　結(jié)果:總共完成120只大鼠的實驗，其中兩只大鼠在實驗過程中死亡:一只手術(shù)日晚被同籠大鼠咬死，另一只術(shù)中麻醉過量致死，其余大鼠術(shù)后均正常存活。各組大鼠的平均吻合時間測定結(jié)果顯示:SM vs SM組、MM vs MM組和SM vs MM組均比Control組所需吻合時間長，而Control組比Stent組吻合所需時間長，結(jié)果具有顯著統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01），可見支架法吻合方便快速，比傳統(tǒng)的各種手工縫合

4、方法均簡單，易于掌握并推廣。各組大鼠的平均腹腔粘連評分結(jié)果顯示:MMvs MM組和Stent組的腹腔粘連評分高于Control組，結(jié)果具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），說明粘膜層與粘膜層對合縫合以及支架法吻合相對更容易導(dǎo)致腹腔粘連，但短期內(nèi)不導(dǎo)致梗阻，而漿膜層與漿膜層對合縫合則腹腔粘連較輕，提示漿膜層外翻的吻合原則可以減少腹腔內(nèi)產(chǎn)生粘連的幾率。各組大鼠的吻合口腸段造影結(jié)果顯示:在術(shù)后30天各組吻合口通暢，均未見明顯狹窄及梗阻，也未見腸瘺發(fā)

5、生，說明腸道的不同層次對合縫合以及支架法吻合對大鼠腸道的愈合是安全可行的，不會導(dǎo)致明顯的腸吻合口瘺以及腸道狹窄和梗阻。吻合口爆破壓結(jié)果顯示:在術(shù)后7天和14天，SM vs SM組、MM vs MM組和SM vs MM組的平均爆破壓均比Control組的要低，結(jié)果具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）;在術(shù)后3天和術(shù)后30天，各組吻合口的爆破壓與Control組相比無明顯差異（P＞0.05），說明在力學(xué)愈合上，在術(shù)后早期，各種縫合或者吻合方式對大

6、鼠腸道的力學(xué)性能無明顯影響，在術(shù)后中期開始相同層次對合縫合法和支架法吻合的方式比其他三種縫合方式在力學(xué)性能上更牢固，但是在后期，各種縫合或者吻合方式均能達(dá)到一致的力學(xué)性能，對大鼠腸道的愈合結(jié)果不產(chǎn)生影響。吻合口羥脯氨酸含量測定結(jié)果顯示:每組的平均羥脯氨酸含量隨時間的增長逐漸增加;而在各個時間點(diǎn)上各組間吻合口羥脯氨酸含量與Control組相比無統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0，05），說明各組吻合口膠原蛋白的形成過程基本一致，均隨著時間的增長而增加，均

7、能正常愈合，且各種縫合方法及支架法吻合方式對膠原蛋白量的生成影響不大。吻合口組織切片HE染色和Masson染色結(jié)果顯示:通過對組織切片評分量化分析，得出Stent組及Control組相比其余幾組炎癥反應(yīng)輕，愈合開始早，但在術(shù)后30天時，各組腸吻合口在組織學(xué)上基本愈合一致;而吻合口組織的TGF-β1、b-FGF和α-SMA免疫組化染色顯示TGF-β1和b-FGF的變化較為一致，隨著時間的增長均出現(xiàn)逐漸下降的趨勢，而α-SMA呈現(xiàn)先增長后下

8、降的趨勢，各個組間的差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0，05）;RT-PCR對吻合口TGF-β1、b-FGF和α-SMA的mRNA含量測定結(jié)果與免疫組化結(jié)果基本一致;且免疫組化結(jié)果和RT-PCR的結(jié)果與文獻(xiàn)報道一致，說明在TGF-β1、b-FGF和α-SMA的表達(dá)上，本研究的幾種腸道縫合方法以及捆綁式支架吻合法對大鼠腸道的愈合無顯著性差異。
　　結(jié)論:
　　1、腸壁不同層次對合縫合以及支架法吻合對大鼠腸道的愈合是安全可行的。
　

9、　2、從力學(xué)愈合上來看，腸道壁相同層次對合縫合和不同層次對合縫合對腸道的愈合在早期無明顯影響，中期相同層次對合縫合具有更好的力學(xué)性能，而后期則各種方式均具有相同的力學(xué)性能。從組織學(xué)愈合上來看，腸道壁相同層次對合縫合能夠更早開始組織修復(fù)過程，但是在后期幾乎無吻合口愈合的差異，各種縫合方法及支架法吻合愈合結(jié)果一致。
　　3、腸道支架法吻合在腸道愈合過程中在力學(xué)愈合上和組織愈合上與按相同層次對合縫合的腸道縫合方法基本一致，并且具有吻合方