版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡(jiǎn)介
1、目的:CD38是一種以NAD+為底物,具有環(huán)化和水解作用的雙功能酶,可分別催化NAD+合成cADPR和水解NAD+或cADPR成ADPR。敲除小鼠CD38基因可導(dǎo)致組織中NAD+濃度顯著升高,Sirt1活性上升。本實(shí)驗(yàn)室的前期工作顯示:CD38基因缺失可明顯加重高脂飲食誘導(dǎo)的ApoE基因敲除小鼠的動(dòng)脈粥樣硬化損傷,并觀察到大量巨噬細(xì)胞在損傷區(qū)域的侵潤(rùn),提示巨噬細(xì)胞在動(dòng)脈粥樣硬化中發(fā)揮重要作用。巨噬細(xì)胞在不同的微環(huán)境下可極化為2種類型:以
2、分泌促炎因子為主的M1型和以分泌抗炎因子為主的M2型。存在于巨噬細(xì)胞膜上的Toll樣受體(Toll like receptor,TLR)通??赏ㄟ^促進(jìn)炎癥介質(zhì)的釋放來抵御外來侵害。TLR2的激活可使巨噬細(xì)胞產(chǎn)生促炎或抗炎作用,探索CD38缺失對(duì)巨噬細(xì)胞TLR2作用的影響及機(jī)制具有重要意義。
方法和結(jié)果:1. CD38-/-小鼠原代的腹腔巨噬細(xì)胞的培養(yǎng)、分離和功能分析:Western Blot結(jié)果顯示,敲除CD38基因可明顯抑制
3、小鼠巨噬細(xì)胞TLR2、Sirt1和p65蛋白表達(dá);2.RAW264.7細(xì)胞的培養(yǎng)和功能分析:Real-time PCR結(jié)果表明,TLR2激動(dòng)劑HKLM可使RAW264.7細(xì)胞中的IL-1βmRNA表達(dá)水平下調(diào),而IL-10 mRNA表達(dá)水平上升;3.抑制RAW264.7細(xì)胞CD38基因表達(dá)及功能分析:利用CRISPR/dCas9技術(shù)抑制 RAW264.7細(xì)胞 CD38基因表達(dá)并采用BioRay的蛋白芯片檢測(cè)炎性因子,觀察到抑制CD38基
4、因表達(dá)可使MCP-1、IL-1 alpha、MIP-1 alpha、RANTES、G-CSF蛋白表達(dá)顯著升高,而Eotaxin2、Fas Ligand、Fractalkine、IL-9、LIX、IL-1270蛋白表達(dá)下降;4. CD38缺失調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞功能的機(jī)制分析:Sirt1激動(dòng)劑白藜蘆醇(RSV)顯著抑制RAW264.7細(xì)胞TLR2、p65和Ac-p65蛋白表達(dá),而 Sirt1抑制劑尼克酰胺(NAM)則可明顯促進(jìn)RAW264.7細(xì)胞
5、的TLR2蛋白表達(dá)。此外,NF-κB抑制劑 PDTC可顯著抑制RAW264.7細(xì)胞TLR2的mRNA及蛋白表達(dá)。
結(jié)論:1.敲除小鼠 CD38基因可明顯下調(diào)巨噬細(xì)胞的TLR2、Sirt1和p65表達(dá)以及影響巨噬細(xì)胞相關(guān)炎性因子如IL-1β或抗炎因子如IL-10的表達(dá)和分泌,提示CD38介導(dǎo)的TLR2激活可能參與巨噬細(xì)胞的炎癥反應(yīng)。2. CD38缺失調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞功能的機(jī)制可能與CD38缺失上調(diào)Sirt1活性,使NF-κB去乙酰化
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- CD38對(duì)巨噬細(xì)胞TLR2基因表達(dá)及功能的影響.pdf
- CD38基因缺失對(duì)巨噬細(xì)胞遷移及其炎癥因子釋放的影響及機(jī)制研究.pdf
- TLR2介導(dǎo)的小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞抗HCV免疫應(yīng)答初探.pdf
- CD38缺失對(duì)LPS誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞炎性因子表達(dá)和分泌的影響及其分子機(jī)制.pdf
- 單核-巨噬細(xì)胞TLR4介導(dǎo)的天然免疫反應(yīng)在肝細(xì)胞損傷中的作用機(jī)制研究.pdf
- 肺泡上皮細(xì)胞對(duì)巨噬細(xì)胞抗Mtb感染中TLR信號(hào)介導(dǎo)炎癥反應(yīng)的影響.pdf
- ABCA1介導(dǎo)載脂蛋白A1調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞炎癥反應(yīng)及其機(jī)制.pdf
- 芍藥苷抑制TLR4介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)保護(hù)小鼠肝缺血再灌注損傷.pdf
- 糖尿病大鼠肺泡巨噬細(xì)胞TLR2的表達(dá)及對(duì)肽聚糖反應(yīng)性的研究.pdf
- 內(nèi)毒素耐受小鼠早期肺部炎癥反應(yīng)及TLR4、TLR2表達(dá)動(dòng)態(tài)變化研究.pdf
- Siglec-1介導(dǎo)巨噬細(xì)胞炎癥反應(yīng)在動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)病中的研究.pdf
- 鋅脂蛋白A20抑制TLR4介導(dǎo)的人單細(xì)胞炎癥反應(yīng)的實(shí)驗(yàn)研究.pdf
- GIT2抑制TLR介導(dǎo)的炎癥反應(yīng).pdf
- 泛福舒通過tlr4和tlr2介導(dǎo)的erk12nfκb通路上調(diào)raw264.7細(xì)胞炎癥因子的表達(dá)
- TLR4-NF-κB通路在CD38基因缺失引起的B淋巴細(xì)胞發(fā)育障礙中的作用.pdf
- TLR4介導(dǎo)的信號(hào)通路對(duì)肝細(xì)胞凋亡的影響及氧化苦參堿的干預(yù)機(jī)制研究.pdf
- TLR2與TLR4配體預(yù)處理對(duì)角膜基質(zhì)細(xì)胞抗煙曲霉菌炎癥反應(yīng)的影響.pdf
- microRNA調(diào)控COPD大鼠肺泡巨噬細(xì)胞TLR2受體表達(dá)的作用機(jī)制研究.pdf
- TLR4受體介導(dǎo)的殼寡糖對(duì)巨噬細(xì)胞激活機(jī)制的研究.pdf
- 睪酮對(duì)小鼠巨噬細(xì)胞及脂肪細(xì)胞共培養(yǎng)體系炎癥因子生成的影響及其機(jī)制的研究.pdf
評(píng)論
0/150
提交評(píng)論