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文檔簡介
1、目的:觀察淺低溫對大鼠全腦缺血再灌注后酸敏感離子通道1a(Acid-SensingIon Channel1a, ASIC1a)和2a(Acid-Sensing Ion Channel2a,ASIC2a)的影響,旨在探討淺低溫復(fù)蘇神經(jīng)元的潛在機制。
方法:95只雄性SD大鼠按隨機數(shù)字表均分為以下五組(n=19):假手術(shù)組(Ⅰ)、模型組(Ⅱ)、淺低溫組(Ⅲ)、PcTX1組(Ⅳ)、淺低溫+PcTX1組(Ⅴ)。采用Pulsinelli
2、四血管阻塞法建立大鼠全腦缺血再灌注損傷模型,缺血15min,再灌注即刻Ⅳ組和Ⅴ組側(cè)腦室注射PcTX16μl(500 ng/ml),其余各組側(cè)腦室注射等容量生理鹽水。同時Ⅲ組和Ⅴ組于再灌注15min內(nèi)將直腸溫度降至32~33℃,并維持6h,其余組采用白熾燈維持直腸溫度36~37℃。再灌注6h及24h后斷頭取海馬,采用westernblot法測定ASIC1a和ASIC2a蛋白水平;再灌注24 h后斷頭取海馬,采用qRT-PCR法測定ASIC
3、1a和ASIC2a mRNA表達(dá)水平,HE染色觀察海馬CA1區(qū)形態(tài)學(xué)改變;再灌注72 h心臟灌注后斷頭取大鼠腦組織測定腦含水量。
結(jié)果:①與Ⅰ組相比,其余四組ASIC1amRNA表達(dá)和ASIC1a蛋白水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);②與Ⅰ組相比,其余四組ASIC2a mRNA表達(dá)和ASIC2a蛋白水平均增高(P<0.05),與Ⅰ組比,Ⅲ組和Ⅴ組ASIC2a mRNA表達(dá)和ASIC2a蛋白水平增高(P<0.05);與Ⅳ組比
4、,Ⅲ組和Ⅴ組ASIC2amRNA表達(dá)和ASIC2a蛋白水平增高(P<0.05);且與再灌注6h相比,再灌注24 hⅡ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ組ASIC2a蛋白水平均增高(P<0.05);③與Ⅰ組相比,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ組CA1區(qū)錐體細(xì)胞數(shù)均減少(P<0.01);與Ⅱ組相比,Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ組CA1區(qū)錐體細(xì)胞數(shù)均增加(P<0.01),尤以Ⅴ組增加最多(P<0.01);④與Ⅰ組相比,Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ組腦含水量均增加(P<0.01);與Ⅱ組相比,Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ組腦含水量均降
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