MiR-122在實驗性大鼠肝癌誘發(fā)過程中表達及其意義.pdf

1、目的:觀察miR-122在二乙基亞硝胺（Diethylnitrosamine，DEN）和微囊藻毒素-LR(Microcystin-LR，MC-LR)誘導(dǎo)大鼠肝癌形成過程中變化，通過分析miR-122與AFP、P53、ADAM17關(guān)系，探討miR-122在肝癌中的意義。
　　方法:將75只雄性SD大鼠隨機分為對照組、模型組，二組均喂養(yǎng)標準大鼠飼料。模型組用二乙基亞硝胺和微囊藻毒素-LR建立大鼠肝癌模型:0.25％DEN溶液(10mg

2、/kg)+MC-LR（20ug/kg）腹腔注射，1次/5天，至16周停止。肝癌形成過程大致可分為三個期，誘癌4周時為肝細胞損傷期，8周至12周時為肝細胞增生-硬化期，16至20周時為肝細胞癌變期;同時，對照組注射生理鹽水。對照組和模型組于第4周、8周、12周、16周、20周分別隨機抽取5只、10只大鼠處死。稱量大鼠體重及肝重，計算肝指數(shù);眼眶取血，測量各期ALT、γ-GT、TBIL水平;熒光定量PCR獲得miR-122水平，肝組織病理檢

3、查，Western Blot技術(shù)定量檢測8周至20周肝組織AFP、p53、ADAM17水平。
　　結(jié)果:1.二乙基亞硝胺+微囊藻毒素-LR誘癌8-12周出現(xiàn)肝硬化，16周以后成功誘導(dǎo)肝硬化伴發(fā)原發(fā)性肝癌，16周時成癌率為5/7，20周是成癌率為6/6，總體死亡率為10/30;對照組大鼠生長良好，無異常死亡。2.大鼠肝癌模型一般情況:模型組在各個時期肝體重指數(shù)，丙氨酰氨基轉(zhuǎn)移酶、γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶、總膽紅素均較對照組高，且具有統(tǒng)計學(xué)意

4、義(P＜0.05)。3.MiR-122在肝癌模型表達情況:qRT-PCR檢測顯示miR-122在肝癌誘發(fā)過程中呈逐漸下降趨勢，且每個時期與對照組存在顯著性差異(P＜0.05)，但是在肝硬化時期，8周和16周無明顯差異(P＞0.05)。4.肝癌組織中AFP、p53、ADAM17的表達:Western Blot檢測8周至20周肝組織中AFP、p53、ADAM17表達水平，AFP在肝硬化時期出現(xiàn)升高，在20周時達到高峰，組內(nèi)存在顯著性差異(P

5、＜0.05);20周時P53、ADAM17較16周時明顯升高，且具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。
　　結(jié)論:1.MC-LR+DEN是比較理想的大鼠肝癌模型誘發(fā)方式，具有穩(wěn)定性、安全性的特點。2.MiR-122在MC-LR+DEN誘發(fā)的大鼠肝癌形成過程中是逐漸下降的，對肝癌具有一定的診斷價值;且miR-122可能與肝癌的預(yù)后相關(guān)，表達量越低預(yù)后越差。3.MiR-122可能通過參與靶點P53、ADAM17調(diào)節(jié)，抑制其表達而發(fā)揮抑癌作用