誘導臍血造血干-祖細胞分化為紅系祖細胞及其規(guī)模化擴增.pdf

1、目前血液來源緊張及輸血相關傳染病的發(fā)生使得臨床輸血治療面臨巨大的挑戰(zhàn)，尋找更為安全、充足的血液來源一直以來都是輸血醫(yī)學研究的重要方向。干細胞技術的不斷發(fā)展使得我們有可能在體外將干細胞定向誘導分化為紅細胞作為血液替代來源，然而目前的技術條件下生產制備干細胞來源的成熟紅細胞產品面臨很多困難，而干細胞來源的紅系祖細胞同樣可以作為非應急性（或擇期）輸血的血液替代產品。本研究擬利用臍帶血造血干/祖細胞作為起始細胞，體外誘導其向紅系祖細胞分化，并添

2、加小分子化合物對誘導擴增體系進行優(yōu)化，初步探討利用生物反應器規(guī)?；苽淠殠а獊碓吹募t系祖細胞的技術方法。本課題研究首先建立了無血清體系中高效誘導臍帶血造血干/祖細胞向紅系祖細胞分化的技術方法，誘導效率超過90％，對獲得的紅系祖細胞進行了多方面的鑒定，并對誘導的紅系祖細胞的不同分化階段進行了動力學分析。為了進一步優(yōu)化誘導擴增體系，實現規(guī)?；瘮U增臍帶血造血干/祖細胞來源的紅系祖細胞，本研究嘗試在誘導擴增體系中添加一種小分子化合物“二甲基乙二

3、?；拾彼帷?Dimethyloxalylglycine，DMOG)，在體外模擬低氧微環(huán)境，提高紅系祖細胞誘導擴增效率。在前述建立的紅系祖細胞誘導擴增體系的基礎上，本研究初步嘗試了利用WAVE波浪式生物反應器結合Fed-batch培養(yǎng)模式誘導擴增紅系祖細胞，力求實現體外規(guī)?；瘮U增臍帶血造血干/祖細胞來源的紅系祖細胞。這些研究結果將為最終實現臍帶血造血干/祖細胞體外誘導分化為紅系祖細胞作為非應急性（或擇期）輸血的血液替代來源奠定實驗基礎。