一殘毀性掌跖角皮癥家系致病基因突變檢測(cè).pdf

1、研究背景：殘毀性掌跖角皮癥(MutilantingPalmoplantarKeratoderma)又稱殘毀性遺傳性角質(zhì)瘤（keratomahereditariamutilans），于1929年由德國(guó)學(xué)者Vohwinkel首先描述并命名，因此該病又被稱為沃溫克耳綜合癥(Vohwinkelsyndrome，VS，OMIM124500)。它是一種罕見的常染色體顯性遺傳病，多呈家族性發(fā)病，同時(shí)也有散發(fā)病例的報(bào)道。該病好發(fā)于白種人女性，多于嬰幼兒

2、起病，病程呈進(jìn)行性發(fā)展。其典型的臨床表現(xiàn)包括:對(duì)稱性彌漫性掌跖角化，掌跖表面呈蜂窩狀小凹餡;手足背部及肘膝關(guān)節(jié)伸側(cè)等可呈典型的海星狀或條狀角化過(guò)度斑塊;遠(yuǎn)端指（趾）間關(guān)節(jié)呈環(huán)形縮窄并逐漸斷離（假阿洪病樣改變）。目前已定位克隆鑒定出兩個(gè)與殘毀性掌跖角化病有關(guān)的致病基因:分別是定位在13號(hào)染色體13q11-12上編碼縫隙連接蛋白Cx26的GJB2基因和定位在1號(hào)染色體1q21上編碼兜甲蛋白的LOR基因。由GJB2基因突變導(dǎo)致的殘毀性掌跖角化

3、病常伴有聽力異常，被稱為典型的殘毀性掌跖角化病;由LOR基因突變導(dǎo)致的殘毀性掌跖角化病常伴有魚鱗病，又被稱為變異型殘毀性掌跖角化病。臨床上我們收集到一殘毀性掌跖角化病伴有感音神經(jīng)性耳聾的家系，并對(duì)該家系進(jìn)行了致病基因的研究。據(jù)我們所知，本研究為國(guó)內(nèi)首次對(duì)該病進(jìn)行致病基因突變檢測(cè)。
　　 目的：對(duì)一個(gè)中國(guó)漢族殘毀性掌跖角化病家系進(jìn)行致病基因突變檢測(cè)，以明確其致病基因及突變類型，以期進(jìn)一步明確臨床表型與基因型的關(guān)系。
　　

4、方法：收集該家系5例患者、12例正常人和100例健康正常對(duì)照外周血標(biāo)本和家系患者臨床資料。用外周血DNA提取試劑盒提取外周血基因組DNA，采用聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)擴(kuò)增候選基因GJB2基因的整個(gè)編碼序列和側(cè)翼序列在內(nèi)的1015bp，擴(kuò)增產(chǎn)物純化后應(yīng)用ABIPRISM3730XL自動(dòng)測(cè)序儀直接雙向測(cè)序，Sequencher4.10.1Demo軟件與基因組序列進(jìn)行比對(duì)分析，以明確具體的突變位置和突變方式。
　　 結(jié)果：PCR產(chǎn)物測(cè)序

5、結(jié)果顯示:該家系所有患者GJB2基因均存在一個(gè)雜合錯(cuò)義突變196G→C，導(dǎo)致第一細(xì)胞外區(qū)域(E1)第66位天冬氨酸被組氨酸替代（即D66H），而家系中12例正常人和100例非家系成員正常對(duì)照的DNA測(cè)序結(jié)果均未發(fā)現(xiàn)此突變。反向測(cè)序結(jié)果亦證實(shí)該突變。
　　 結(jié)論：該家系所有患者均存在GJB2基因突變(D66H)，此基因?yàn)橐阎臍垰哉契沤瞧ぐY致病基因，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明GJB2基因中D66H錯(cuò)義突變也是中國(guó)漢族人群中殘毀性掌跖角化伴耳聾