丙烯酰胺對大鼠生精細胞XRCC1蛋白表達與凋亡的影響.pdf

1、目的:
　　 近年來，男性生殖能力普遍下降，環(huán)境因素直接影響男性生殖健康。丙烯酰胺（acrylamide）是環(huán)境和食品中有毒物質(zhì)，對人類生殖健康產(chǎn)生嚴重影響。丙烯酰胺的生殖毒性可以導(dǎo)致男性不育，機制尚未完全清楚。
　　 活性氧(reactiveoxygenspecies)越來越受到男性生殖醫(yī)學(xué)工作者的重視，氧化應(yīng)激損傷被認為是造成男性不育的重要病因之一。高濃度活性氧被認為能夠誘發(fā)生精細胞DNA損傷和加速生精細胞的凋亡。X

2、RCC1蛋白（X線修復(fù)交叉互補組1）是通過DNA堿基切除修復(fù)，特異性識別并切除5mC的糖苷酶(glycosylase)，切除5mC產(chǎn)生AP位點(apurinic/apyrimidinicsite)，進而啟動堿基切除修復(fù)途徑(BER)來實現(xiàn)DNA修復(fù)的。對于氧化和非氧化的DNA損傷，XRCC1通過BER途徑與多聚ADP核糖聚合酶(PARP)、DNA連接酶Ⅲ及DNA多聚酶β作用來修復(fù)DNA，進而維持染色質(zhì)的完整性，從而減少生精細胞凋亡。

3、r>　　 本研究通過對SD大鼠不同劑量的丙烯酰胺染毒，觀察大鼠附睪中精子密度、畸形率和丙二醛(MDA)水平變化，進一步研究睪丸組織中XRCC1蛋白表達和生精細胞凋亡的變化以及相關(guān)性，探討丙烯酰胺染毒時，對SD大鼠生精功能的影響及其可能的機制。
　　 方法:
　　 選擇符合試驗標準的成年健康雄性SD大鼠(體重150±10g)40只。自由飲雙蒸水，適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后，隨機分為四組，空白對照組及染毒低劑量組，中劑量組，高劑量組

4、，每組10只，標準飼料喂養(yǎng)，以灌胃方式分別給予空白對照組雙蒸水、低劑量組20mg/kg丙烯酰胺水溶液、中劑量組40mg/kg丙烯酰胺水溶液、高劑量組60mg/kg丙烯酰胺水溶液，灌胃體積10ml/kg，每天上午8時灌胃，每日1次，每周5次，連續(xù)2周后，取右側(cè)附睪并測定附睪中精子密度及畸形率，同時測定精漿中丙二醛水平，取右側(cè)睪丸組織組化法觀察生精細胞XRCC1的表達，TUNEL法觀察生精細胞的凋亡。采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件，單因素方差

5、分析(one-wayANOVA)方法，兩組間比較采用LSD法;以XRCC1蛋白表達與凋亡之間的關(guān)系做直線相關(guān)性分析，以α=0.05，P＜0.05表示有顯著性差異，P＜0.01表示有極顯著性差異。
　　 結(jié)果:
　　 隨著染毒劑量的增加，大鼠體重和睪丸重量呈下降趨勢，(P＜0.05)各染毒組附睪中精子密度下降、精子畸形率及丙二醛水平(MDA)均明顯升高，與對照組比較均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，隨染毒劑量的增加，精子密度

6、下降顯著，精子畸形率和丙二醛水平升高顯著。各染毒組XRCC1蛋白表達下降，凋亡生精細胞增加，與對照組比較均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，隨染毒劑量的增加，睪丸生精細胞XRCC1蛋白表達下降顯著，凋亡生精細胞升高顯著。XRCC1蛋白表達下降及凋亡生精細胞升高呈現(xiàn)明顯的劑量-效應(yīng)反應(yīng)關(guān)系。
　　 結(jié)論:
　　 隨丙烯酰胺染毒劑量的增加，大鼠附睪精子密度下降，畸形率及丙二醛水平升高，其可能與氧化性損傷有關(guān)。同時睪丸生精細胞XR