查爾酮類(lèi)細(xì)胞周期蛋白依賴(lài)性激酶抑制劑的設(shè)計(jì)、合成及其抗腫瘤活性研究.pdf

1、惡性腫瘤是危害人們生命健康的重大疾病，其死亡率僅次于心血管病而居第二?，F(xiàn)在臨床應(yīng)用的傳統(tǒng)抗腫瘤藥物最大的缺點(diǎn)是毒性大、選擇性低，尋找高效、低毒、對(duì)靶點(diǎn)特異性強(qiáng)的新型抗癌藥物己成為當(dāng)前抗腫瘤藥物研究的發(fā)展方向。腫瘤學(xué)研究表明，細(xì)胞周期失控是癌變的重要原因。在腫瘤細(xì)胞分化增殖信號(hào)通路的許多關(guān)鍵酶現(xiàn)已成為藥物篩選重要靶點(diǎn)。其中，細(xì)胞周期蛋白依賴(lài)性激酶(CDK)抑制劑已被證實(shí)可有效阻滯癌細(xì)胞周期，抑制腫瘤細(xì)胞增殖，對(duì)該類(lèi)抑制劑的深入研究將成為腫

2、瘤治療的新亮點(diǎn)。
　　 本論文以本實(shí)驗(yàn)室前期工作篩選出的活性化合物L(fēng)41為先導(dǎo)物，根據(jù)CDK蛋白與配體的結(jié)構(gòu)解析結(jié)果，綜合分析L41衍生物的構(gòu)效關(guān)系，在保留先導(dǎo)物與靶點(diǎn)蛋白結(jié)合位點(diǎn)形成氫鍵基團(tuán)的基礎(chǔ)上，增加與CDK的ATP結(jié)合口袋的結(jié)合位點(diǎn)，共設(shè)計(jì)、合成了一系列新型查爾酮類(lèi)化合物。共計(jì)47個(gè)新化合物，其中目標(biāo)化合物22個(gè)，新中間體25個(gè)。
　　 我們還針對(duì)先導(dǎo)物的化學(xué)合成路線進(jìn)行了改進(jìn)。從原工藝路線的乙酰化中間體出發(fā)，先

3、進(jìn)行Boc保護(hù)，再進(jìn)行羥醛縮合，最后脫保護(hù)基得到目標(biāo)化合物。新工藝路線雖然增加了保護(hù)和脫保護(hù)步驟，但使副反應(yīng)減少，后處理操作簡(jiǎn)單，并將其做成鹽酸鹽以提高該化合物的水溶性，為進(jìn)一步研究開(kāi)發(fā)奠定了基礎(chǔ)。另外合成實(shí)驗(yàn)中意外地發(fā)現(xiàn)苯乙酮與取代苯甲醛可直接得到環(huán)合的二氫黃酮衍生物，進(jìn)而系統(tǒng)地研究了查爾酮環(huán)合實(shí)驗(yàn)條件，為黃烷酮衍生物的合成途徑提供了一種更為方便的選擇。
　　 目標(biāo)化合物的CDK1抑制活性的初步實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，化合物A4、A7、

4、A8、A10、A19、B2在50UM濃度水平表現(xiàn)出與先導(dǎo)物L(fēng)41相當(dāng)?shù)囊种苹钚?。目?biāo)化合物抑制HCT116的體外抗腫瘤實(shí)驗(yàn)表明，哌啶環(huán)氮原子引入BOC保護(hù)所得目標(biāo)化合物4A0-19和481-3的體外抑瘤活性明顯降低，表明哌啶環(huán)上仲胺氮原子對(duì)于化合物的抗腫瘤活性方面具有重要作用，而且化合物A5、A7、A8、A9、B2、4A13對(duì)HCT116細(xì)胞的抑制作用強(qiáng)于先導(dǎo)物L(fēng)41。在此基礎(chǔ)上，選擇上述6個(gè)活性較好的化合物進(jìn)一步測(cè)定其對(duì)A549、MC

5、F-7、Hela等7株腫瘤細(xì)胞株的體外抑制作用，結(jié)果顯示化合物A5、A8的活性較高，對(duì)7株腫瘤細(xì)胞的增殖抑制的IC50值均低于先導(dǎo)物L(fēng)41，具有廣譜的體外抗腫瘤活性。其中A8對(duì)MDA-MB231的抑制作用IC50值較低，可達(dá)到0.83uM?；衔顰7、A9亦表現(xiàn)出較強(qiáng)的體外抑制腫瘤細(xì)胞增殖作用。
　　 鑒于先導(dǎo)物Flavopiridol抗腫瘤機(jī)制是多方面的，我們選擇了體外抗瘤譜較廣且同時(shí)具有CDK1抑制活性的化合物A8進(jìn)行初步的