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文檔簡介
1、目的:
縫隙連接(gap junction GJ)廣泛分存于心腦血管系統(tǒng),并參于多種疾病的發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)歸。前期研究表明,GJ可能參于CVS的形成,本實驗應(yīng)用免疫印跡技術(shù)研究蛛網(wǎng)膜下腔出血(SAH)后不同出血量致腦血管痙攣程度與縫隙連接蛋白Cx43表達變化的關(guān)系,為進一步明確GJ參與蛛網(wǎng)膜下腔出血后CVS的機制奠定基礎(chǔ)。
方法:
1.建立兔二次SAH后CVS模型及分組:新西蘭大白兔3%戊巴比妥鈉
2、(1ml/kg)麻醉后,枕大池穿刺注射未肝素化新鮮自體動脈血(0.5ml,0.75ml,1.0ml,1.5ml),清醒后正常喂養(yǎng),24h后二次重復(fù)注血。
2.動物CVS模型的觀測:按照不同注血量分組(0.5ml.,0.75ml,1.0ml,1.5ml),在建立模型前及建立模型后的7d時行兩次DSA檢查,比較各實驗組基底動脈直徑的變化。
3.Cx43蛋白表達的變化:各組動物在行DSA檢查后處死取腦,分離腦基底動
3、脈,應(yīng)用Western Blotting技術(shù)分別檢測基底動脈Cx43表達的變化。
4.各實驗組Cx43蛋白表達變化與CVS的關(guān)系:Cx43不同出血量表達變化與基底動脈直徑變化是否相關(guān)使用直線相關(guān)分析及用GraphPad prism5做圖。
結(jié)果:
1.成功建立兔二次SAH后CVS模型:DSA造影顯示各注血組腦血管均出現(xiàn)狹窄,并與出血量成正相關(guān)。
2.SAH后不同出血量腦血管GJ蛋白
4、表達的變化:腦動脈血管壁Cx43蛋白在二次注血后表達隨出血量的增加而逐漸增加,其中表達值分別是0.5ml組為49.8%±6.5%(P<0.05),0.75ml組為58.3%±5.8%(P<0.05),1.0ml組為66.4%±7.6%(P<0.01),1.5ml組為76.2%±4.5%(P<0.01)。
3.SAH后不同出血量Cx43蛋白表達變化與基底動脈直徑的變化的相關(guān)性:SAH后不同出血量基底動脈Cx43蛋白表達的變化
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