吡格列酮（Pioglitazone）對(duì)大鼠局灶性腦缺血的保護(hù)作用及其PPARγ依賴(lài)性抑制NF-κB信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的機(jī)制.pdf

1、目的：觀察吡格列酮(Pioglitazone，Piog)對(duì)大鼠永久性局灶性腦缺血的保護(hù)作用及其過(guò)氧化物酶體增殖劑激活受體γ(peroxisome proliferation-activated receptor,PPARγ)依賴(lài)性抑制NF-кB信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的作用。 方法：采用大鼠永久性大腦中動(dòng)脈阻塞(permanent middle cerebral artery occlusion，pMCAO)模型觀察Piog 0.5、1、2

2、mg/kg對(duì)腦梗塞體積、腦水腫、行為學(xué)癥狀的影響。大鼠腦缺血前24小時(shí)、腦缺血時(shí)兩次腹腔注射Piog，或者，大鼠腦缺血后10分鐘一次腹腔注射Piog。大鼠腦缺血前30 min側(cè)腦室注射PPARγ的特異性的抑制劑GW9662150、300、600nmol/kg，大鼠腦缺血后10分鐘一次腹腔注射Piog 1mg/kg，采用pMCAO模型觀察GW9662對(duì)腦梗塞體積及NF-кB信號(hào)通路的.影響。采用Western-blot法檢測(cè)紋狀體boBα

3、、p-ERK的蛋白水平；應(yīng)用免疫組織化學(xué)法分析紋狀體NF-кB的核轉(zhuǎn)位；采用RT-PCR法檢測(cè)紋狀體NF-кB靶基因p53 mRNA的表達(dá)。 結(jié)果：Piog 0.5、1、2mg/kg腹腔注射呈劑量依賴(lài)性改善行為學(xué)癥狀，減少pMCAO大鼠腦梗死體積，降低腦含水量(P<0.05，P<0.01)。GW9662 300、600nmol/kg能拮抗Piog對(duì)腦缺血的保護(hù)作用。Western-blot顯示：大鼠pMCAO后6小時(shí)紋狀體IкB

4、α的蛋白含量顯著減少(P<0.01)，Piog 0.5、1、2mg/kg能顯著增加紋狀體IKBα的蛋白含量(P<0.01)，GW9662 300、600nmol/kg能顯著降低紋狀體IкBα的蛋白含量(P<0.01)；大鼠pMCAO后12小時(shí)紋狀體p-ERK的蛋白含量顯著減少(P<0.01)，Piog0.5、1、2mg/kg能顯著增加紋狀體p-ERK蛋白含量(P<0.01)，GW9662 300、600nmol/kg能顯著降低紋狀體的p

5、-ERK蛋白含量(P<0.01)；免疫組化證明：假手術(shù)組大鼠大腦紋狀體NF-кB主要表達(dá)在神經(jīng)細(xì)胞胞漿中，pMCAO后12小時(shí)，模型組大鼠大腦紋狀體NF-кB主要表達(dá)于神經(jīng)細(xì)胞胞核，說(shuō)明缺血使NF-кB從細(xì)胞漿移位至細(xì)胞核；Piog 0.5、1、2mg/kg能抑制NF-кB的核轉(zhuǎn)位(P<0.01)；GW9662 300、600nmol/kg能拮抗Piog對(duì)NF-кB的核轉(zhuǎn)位的抑制(P<0.05)。RT-PCR結(jié)果表明：大鼠pMCAO后1