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文檔簡介
1、背景與目的:肺癌是當(dāng)今世界上對(duì)人類健康和生命危害最大的惡性腫瘤。近半個(gè)世紀(jì)以來,盡管各種肺癌治療手段不斷發(fā)展,但遺憾的是包括我國在內(nèi)的絕大多數(shù)國家肺癌的療效并無明顯提高,肺癌總的治愈率仍低于15%。因此研究和開發(fā)抗肺癌的有效新藥物仍是腫瘤領(lǐng)域的重要任務(wù)。自20世紀(jì)70年代以來,人們逐漸注意到必需微量元素硒及其化合物的防癌抗癌作用。國內(nèi)外學(xué)者進(jìn)行了大量的流行病學(xué)研究和基礎(chǔ)研究,發(fā)現(xiàn)硒及其不同形式的化合物能夠降低包括肺癌在內(nèi)多種腫瘤的發(fā)病率
2、,也能夠明顯抑制乳腺癌、前列腺癌等細(xì)胞株體外增殖能力,并可以通過多種機(jī)制導(dǎo)致癌細(xì)胞周期阻滯而影響細(xì)胞增殖。這無疑也為開發(fā)抗肺癌新藥提供了新的思路。目前在硒的體外研究中,甲基硒酸(methylseleninic acid,MSA)可能是最有希望的硒化合物。因?yàn)楸患?xì)胞攝取后,MSA可以通過非β裂解酶途徑(β裂解酶在體外細(xì)胞中表達(dá)水平受限),持續(xù)穩(wěn)定地轉(zhuǎn)化為甲基硒(甲基硒抑制細(xì)胞生長的能力最強(qiáng),但該化合物非常不穩(wěn)定),故MSA的抗癌效能強(qiáng)于其
3、他依賴于β裂解酶代謝途徑的硒化合物,如無機(jī)硒化合物或硒-甲基硒代半胱氨酸等。 迄今,有關(guān)甲基硒酸對(duì)人高轉(zhuǎn)移大細(xì)胞肺癌細(xì)胞株L9981的抗癌作用及其分子機(jī)理的研究國內(nèi)外均無報(bào)道。故本研究應(yīng)用MSA處理人高轉(zhuǎn)移大細(xì)胞肺癌細(xì)胞株L9981,旨在初步探討甲基硒酸對(duì)人高轉(zhuǎn)移大細(xì)胞肺癌細(xì)胞株L9981是否具有生長抑制、細(xì)胞周期阻滯作用及其可能的分子機(jī)制。 方法:本研究應(yīng)用體外細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù),通過臺(tái)盼藍(lán)計(jì)數(shù)法觀察MSA對(duì)人高轉(zhuǎn)移大細(xì)胞肺
4、癌細(xì)胞株L9981生長曲線的影響,平板法克隆形成實(shí)驗(yàn)觀察MSA對(duì)L9981肺癌細(xì)胞株克隆形成能力的影響,流式細(xì)胞術(shù)檢測MSA對(duì)L9981肺癌細(xì)胞株細(xì)胞周期分布的影響以及周期相關(guān)基因p53和p21表達(dá)水平的變化。 結(jié)果:本研究在國內(nèi)外首次觀察到:(1)MSA可顯著抑制人高轉(zhuǎn)移大細(xì)胞肺癌細(xì)胞株L9981的體外增殖能力,并具有劑量依賴性,0.5、2.5、5.0和7.5μmol/LMSA組L9981細(xì)胞株的體外增殖能力均顯著低于對(duì)照組(
5、P<0.05或P<0.01);5.0μmol/L MSA抑制L9981細(xì)胞株體外增殖能力的作用類似于2.5μg/mlDDP(8.3μmol/L DDP)的抑制作用;(2)MSA濃度在2.5、5.0和7.5μmol/L時(shí)可顯著抑制L9981的克隆形成能力(P<0.05),并具有劑量依賴性;(3)MSA能將人高轉(zhuǎn)移大細(xì)胞肺癌細(xì)胞株L9981阻滯在G1/G0期,MSA的這種阻滯作用具有時(shí)間依賴性;(4)MSA能將人高轉(zhuǎn)移大細(xì)胞肺癌細(xì)胞株L99
6、81阻滯在G2/M期,MSA的這種阻滯作用具有劑量依賴性;(5)MSA能顯著上調(diào)人高轉(zhuǎn)移大細(xì)胞肺癌細(xì)胞株L9981 p53和p21表達(dá)水平(P<0.01),并具有明顯的劑量依賴性。 結(jié)論:(1)MSA可顯著抑制人高轉(zhuǎn)移大細(xì)胞肺癌細(xì)胞株L9981的體外增殖能力,并具有劑量依賴性,可將細(xì)胞阻滯于G0/G1期和G2/M期;(2)MSA可顯著抑制L9981肺癌細(xì)胞株的體外克隆形成能力,并呈劑量依賴性;(3)MSA的抗肺癌作用可能與其上調(diào)
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