電擊傷后心臟組織TIMP-1及a-Actin表達的實驗研究.pdf

1、目的：目前電擊傷(死)案件隨著電力事業(yè)蓬勃發(fā)展呈逐年增加的趨勢，法醫(yī)學檢案中用低壓電來自殺或謀殺的案件也不少見。目前國內(nèi)外法醫(yī)學家在生前電擊傷(死)和死后電擊傷的鑒別及電損傷時間的推斷等方面研究取得了一定進展，但仍沒有取得重大突破。為了準確鑒別生前電擊和死后電擊傷以及損傷時間的準確推斷，我們設計了該實驗。 方法：1．利用220V交流電(50Hz，150-200mA)電擊Wister大白鼠胸部(心臟體表投影位置)30秒鐘復制動物模

2、型。2．電擊后在不同時間(O分鐘、30分鐘、1小時、2小時、3小時、4小時、5小時、6小時、8小時、12小時、1天、3天、6天、12天)斷頸處死；正常Wister大白鼠斷頸處死后不同時間(O分鐘、30分鐘、2小時)電擊(電擊方法及時間等同前)。手術(shù)打開胸腔，取出心臟，PBS液沖洗后，將標本置于10％甲醛溶液中固定，作病理切片(5μm)，通過HE染色觀察其組織病理學改變；以TIMP．1、a-Actin為一抗標記不同時間的心臟組織，觀察其分

3、布情況。 結(jié)果： 電擊后0分鐘至6小時，可見心肌細胞呈灶性的變性、壞死，部分心肌細胞呈現(xiàn)波紋狀改變；部分心肌細胞胞膜橫紋不清；胞漿凝聚、均質(zhì)化、嗜酸性變；細胞核深染、邊集、扭曲、伸長，部分細胞核呈空泡狀；心肌細胞間隙增寬，部分區(qū)域可見散在性出血；心肌間細小血管擴張，紅細胞聚集，血管內(nèi)皮細胞腫脹、核深染。傷后8小時至3天，心肌變性壞死的范圍擴大，細胞濁腫更加明顯，心肌細胞內(nèi)肌絲間隙增寬，部分心肌細胞呈不同程度肌溶解狀態(tài)；心

4、肌間細小血管擴張，內(nèi)皮細胞腫脹，壞死脫落，平滑肌層疏松腫脹，大量紅細胞粘附于血管壁，管腔內(nèi)可見少量的嗜中性粒細胞聚集，細小血管內(nèi)可見透明血栓形成。傷后第6天至12天，心肌溶解壞死較前減輕，并有少許成纖維細胞增生。本實驗中僅見輕微的炎癥反應，這與我們前期電擊傷研究的結(jié)果一致。 TIMP-1蛋白廣泛表達于受損的心肌細胞肌漿內(nèi)，呈棕褐色，而正常心肌細胞肌漿呈陰性。電擊傷后O分鐘，可見心肌細胞TIMP．1表達呈灶性分布，而心外膜及心內(nèi)膜

5、下層心肌細胞肌漿呈陰性；電擊傷后1小時，TIMP-1的分布越來越廣泛，在心肌各層均可見到大量陽性表達的TIMP一1，包括心內(nèi)膜、心外膜下心肌，傷后第3天達到高峰，隨后表達逐漸下降；在傷后12天，心肌TIMP一1表達范圍較前明顯縮小，但仍表達于小部分心肌。 a-Actin蛋白廣泛表達于正常心肌細胞肌漿內(nèi)，呈均勻的棕褐色；血管內(nèi)皮表達呈強陽性(深棕褐色)，而變性、壞死心肌呈現(xiàn)不同程度缺染或弱染，這些染色相互夾雜呈花斑狀，受損心肌細胞

6、肌漿隨著損傷程度的加深而表達減弱。電擊傷后O分鐘起至24小時，a-Actin表達于肌層的呈小灶狀、斑片狀及條片狀，并呈現(xiàn)逐漸減弱的趨勢；傷后第3天起至第12天，a-Actin表達分布越來越廣泛，在心肌各層均可見到大量陽性表達，包括心內(nèi)膜、心外膜下心肌。 結(jié)論： 1、電擊傷早期即見大量心肌纖維斷裂，胞漿凝聚及嗜酸性變；核固縮、深染、扭曲等。這些病理改變與急性心肌梗死等其它心肌疾病和損傷不盡相同，對電擊傷的診斷有一定的意義。

7、 2、電擊傷后心臟組織TIMP-l和a-Actin表達程度有時間依賴型，有助于損傷時間的推斷。 3、心臟電損傷中基因芯片的應用價值尚需深入研究。 S100A9是S100蛋白家族(包括S100Al～S100A13、S100B、S100C等蛋白)中一員，主要分布于脾臟、肺臟和皮膚等器官，表達于嗜中性粒細胞、單核細胞、角化細胞等的胞漿和細胞外液中，是一種與炎癥、創(chuàng)傷、腫瘤關(guān)系密切的鈣結(jié)合蛋白，在法醫(yī)學上，可能有助于電擊