電擊傷后心臟組織TIMP-1及a-Actin表達(dá)的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：目前電擊傷(死)案件隨著電力事業(yè)蓬勃發(fā)展呈逐年增加的趨勢(shì)，法醫(yī)學(xué)檢案中用低壓電來自殺或謀殺的案件也不少見。目前國內(nèi)外法醫(yī)學(xué)家在生前電擊傷(死)和死后電擊傷的鑒別及電損傷時(shí)間的推斷等方面研究取得了一定進(jìn)展，但仍沒有取得重大突破。為了準(zhǔn)確鑒別生前電擊和死后電擊傷以及損傷時(shí)間的準(zhǔn)確推斷，我們?cè)O(shè)計(jì)了該實(shí)驗(yàn)。 方法：1．利用220V交流電(50Hz，150-200mA)電擊Wister大白鼠胸部(心臟體表投影位置)30秒鐘復(fù)制動(dòng)物模

2、型。2．電擊后在不同時(shí)間(O分鐘、30分鐘、1小時(shí)、2小時(shí)、3小時(shí)、4小時(shí)、5小時(shí)、6小時(shí)、8小時(shí)、12小時(shí)、1天、3天、6天、12天)斷頸處死；正常Wister大白鼠斷頸處死后不同時(shí)間(O分鐘、30分鐘、2小時(shí))電擊(電擊方法及時(shí)間等同前)。手術(shù)打開胸腔，取出心臟，PBS液沖洗后，將標(biāo)本置于10％甲醛溶液中固定，作病理切片(5μm)，通過HE染色觀察其組織病理學(xué)改變；以TIMP．1、a-Actin為一抗標(biāo)記不同時(shí)間的心臟組織，觀察其分

3、布情況。 結(jié)果： 電擊后0分鐘至6小時(shí)，可見心肌細(xì)胞呈灶性的變性、壞死，部分心肌細(xì)胞呈現(xiàn)波紋狀改變；部分心肌細(xì)胞胞膜橫紋不清；胞漿凝聚、均質(zhì)化、嗜酸性變；細(xì)胞核深染、邊集、扭曲、伸長，部分細(xì)胞核呈空泡狀；心肌細(xì)胞間隙增寬，部分區(qū)域可見散在性出血；心肌間細(xì)小血管擴(kuò)張，紅細(xì)胞聚集，血管內(nèi)皮細(xì)胞腫脹、核深染。傷后8小時(shí)至3天，心肌變性壞死的范圍擴(kuò)大，細(xì)胞濁腫更加明顯，心肌細(xì)胞內(nèi)肌絲間隙增寬，部分心肌細(xì)胞呈不同程度肌溶解狀態(tài)；心

4、肌間細(xì)小血管擴(kuò)張，內(nèi)皮細(xì)胞腫脹，壞死脫落，平滑肌層疏松腫脹，大量紅細(xì)胞粘附于血管壁，管腔內(nèi)可見少量的嗜中性粒細(xì)胞聚集，細(xì)小血管內(nèi)可見透明血栓形成。傷后第6天至12天，心肌溶解壞死較前減輕，并有少許成纖維細(xì)胞增生。本實(shí)驗(yàn)中僅見輕微的炎癥反應(yīng)，這與我們前期電擊傷研究的結(jié)果一致。 TIMP-1蛋白廣泛表達(dá)于受損的心肌細(xì)胞肌漿內(nèi)，呈棕褐色，而正常心肌細(xì)胞肌漿呈陰性。電擊傷后O分鐘，可見心肌細(xì)胞TIMP．1表達(dá)呈灶性分布，而心外膜及心內(nèi)膜

5、下層心肌細(xì)胞肌漿呈陰性；電擊傷后1小時(shí)，TIMP-1的分布越來越廣泛，在心肌各層均可見到大量陽性表達(dá)的TIMP一1，包括心內(nèi)膜、心外膜下心肌，傷后第3天達(dá)到高峰，隨后表達(dá)逐漸下降；在傷后12天，心肌TIMP一1表達(dá)范圍較前明顯縮小，但仍表達(dá)于小部分心肌。 a-Actin蛋白廣泛表達(dá)于正常心肌細(xì)胞肌漿內(nèi)，呈均勻的棕褐色；血管內(nèi)皮表達(dá)呈強(qiáng)陽性(深棕褐色)，而變性、壞死心肌呈現(xiàn)不同程度缺染或弱染，這些染色相互夾雜呈花斑狀，受損心肌細(xì)胞

6、肌漿隨著損傷程度的加深而表達(dá)減弱。電擊傷后O分鐘起至24小時(shí)，a-Actin表達(dá)于肌層的呈小灶狀、斑片狀及條片狀，并呈現(xiàn)逐漸減弱的趨勢(shì)；傷后第3天起至第12天，a-Actin表達(dá)分布越來越廣泛，在心肌各層均可見到大量陽性表達(dá)，包括心內(nèi)膜、心外膜下心肌。 結(jié)論： 1、電擊傷早期即見大量心肌纖維斷裂，胞漿凝聚及嗜酸性變；核固縮、深染、扭曲等。這些病理改變與急性心肌梗死等其它心肌疾病和損傷不盡相同，對(duì)電擊傷的診斷有一定的意義。

7、 2、電擊傷后心臟組織TIMP-l和a-Actin表達(dá)程度有時(shí)間依賴型，有助于損傷時(shí)間的推斷。 3、心臟電損傷中基因芯片的應(yīng)用價(jià)值尚需深入研究。 S100A9是S100蛋白家族(包括S100Al～S100A13、S100B、S100C等蛋白)中一員，主要分布于脾臟、肺臟和皮膚等器官，表達(dá)于嗜中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞、角化細(xì)胞等的胞漿和細(xì)胞外液中，是一種與炎癥、創(chuàng)傷、腫瘤關(guān)系密切的鈣結(jié)合蛋白，在法醫(yī)學(xué)上，可能有助于電擊