梓醇在糖尿病大鼠周?chē)窠?jīng)病變中的作用及機(jī)制探討.pdf

1、本文以體外細(xì)胞篩選的實(shí)驗(yàn)結(jié)果為基礎(chǔ)，利用已篩選出來(lái)活性單體化合物梓醇，以大鼠DPN模型模擬人類(lèi)的DPN，在生物體內(nèi)揭示其治療DPN的機(jī)制，為該藥的開(kāi)發(fā)和臨床應(yīng)用奠定一定的基礎(chǔ)，豐富祖國(guó)醫(yī)學(xué)的理論和方法，提高中醫(yī)藥治療DPN的水平。 方法：健康雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠，隨機(jī)分為正常對(duì)照組(NC組，n=6)，糖尿病對(duì)照組(DC組，n=7)和糖尿病Catalpol干預(yù)組(CI組，n=7)。用鏈脲菌素(strepto

2、zotocin，STZ)腹腔注射方式建立DM大鼠模型。CI組8周后開(kāi)始予Catalpol干預(yù)2周(5mg/kg體重，日1次，腹腔注射)。各組大鼠8周、10周時(shí)分別進(jìn)行神經(jīng)電生理檢查，10周后從大鼠心臟取血測(cè)定糖化血紅蛋白(HbA1c)，取大鼠L5背根神經(jīng)節(jié)(dorsalrootganglion，DRG)和坐骨神經(jīng)。電鏡觀察坐骨神經(jīng)超微結(jié)構(gòu)的變化，免疫組織化學(xué)染色法檢測(cè)IGF-Ⅰ和磷酸化Akt(p-Akt)在DRG中的表達(dá)，圖像分析系統(tǒng)進(jìn)

3、行半定量分析。 結(jié)果：1.DC組和CI組大鼠體重(g)分別為239.46±39.66和245.05±32.10，均顯著低于NC組的351.67±62.53(P＜0.001)；DC組和CI組大鼠血糖(mmol/L)分別為23.33±4.96和23.74±5.05，明顯高于NC組的5.70±1.25(P＜0.001)；10周時(shí)DC組和CI組大鼠HbA1c(﹪)分別為5.80±0.76和6.22±0.86，明顯高于NC組的2.25±0

4、.07(P＜0.001)；而DC組和CI組的體重、血糖和HbA1c均無(wú)顯著性差異(P＞0.05)。2.DC組和CI組8周時(shí)運(yùn)動(dòng)神經(jīng)傳導(dǎo)速度(MNCV)(m/s)分別為31.7±2.88和30.93±8.01，均顯著低于NC組的41.78±4.27(P＜0.05)；DC組和CI組10周時(shí)MNCV(m/s)分別為27.54±4.95和28.45±7.14，均顯著低于NC組的40.25±1.77(P＜0.05)。DC組和CI組8周時(shí)感覺(jué)神經(jīng)傳

5、導(dǎo)速度(SNCV)(m/s)分別為31.05±4.97和25.98±3.01，均顯著低于NC組的38.97±2.33(P＜0.05)；DC組和CI組10周時(shí)SNCV(m/s)分別為26.63±3.40和27.53±3.96，均顯著低于NC組的35.03±3.61(P＜0.05)。DC組和CI組8周時(shí)F波的最短潛伏期(minFLat)(ms)分別為7.13±0.52和8.30±0.62，均顯著高于NC組的7.13±0.52(P＜0.05)

6、；DC組和CI組10周時(shí)minFLat(ms)分別為8.43±0.96和8.20±0.78，均顯著高于NC組的7.31±0.23(P＜0.05)。雖然干預(yù)后MNCV、SNCV和minFLat較干預(yù)前有改善的趨勢(shì)，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。各組大鼠波幅的比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。3.DC組和CI組IGF-Ⅰ在DRG中的表達(dá)分別為16.63±4.45(×10-2)和19.39±1.19(×10-2)，明顯低于NC組的20.92

7、±0.91(×10-2)(P＜0.05)；Catalpol干預(yù)2周后，IGF-Ⅰ的表達(dá)高于DC組(P＜0.05)，但與NC組比較仍稍低(P＜0.05)。4.DC組和CI組DRG中p-Akt的表達(dá)分別為42.42±3.47(×10-3)和49.84±2.10(×10-3)，明顯低于NC組的54.41±9.10(×10-3)(P＜0.05)；Catalpol干預(yù)2周后，p-Akt的表達(dá)高于DC組(P＜0.05)，但與NC組比較仍稍低(P＜0

8、.05)。5.透射電鏡觀察可見(jiàn)DM大鼠坐骨神經(jīng)較正常大鼠有明顯的髓鞘變性，Catalpol干預(yù)后有明顯的改善。 結(jié)論：1.DM大鼠10周時(shí)，IGF-Ⅰ在DRG中的表達(dá)減少并伴隨其主要傳導(dǎo)通路PI3K/Akt的下游效應(yīng)分子Akt的表達(dá)減少，DPN的發(fā)生發(fā)展與PI3K-Akt通路被阻斷相關(guān)。2.Catalpol在不影響血糖的情況下，對(duì)DM大鼠的周?chē)窠?jīng)具有一定的保護(hù)作用，作用機(jī)制可能是Catalpol通過(guò)上調(diào)IGF-Ⅰ后，部分改善其