組蛋白去乙?；敢种苿〧K228對人肝癌細胞HepG2生長抑制研究.pdf

1、中南大學(xué)碩士學(xué)位論文組蛋白去乙?；敢种苿〧K228對人肝癌細胞HepG2生長抑制研究姓名：孫開勝申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師：徐克前20050501A B S T R A C TO b j e c t i v e ：T o i n v e s t i g a t e t h e e f f e c t o f F K 2 2 8 ( F R 9 0 12 2 8 ，d e p s i p e p t i d e

2、 ) ，an o v e lh i s t o n ed e a c e t y l a s ei n h i b i t o ro nh u m a n h e p a t o m ac e l l l i n eH e D G 2 ．M e t h o d s ：I n h i b i t i o no fp r o l i f e r a t i o nw a sm e a s u r e db yM T T a s s a y

3、；m o r p h o l o g i c a l a s s e s s m e n t o fa p o p t o s i s w a s e x a m i n e d b y l i g h t a n df l u o r e s c e n c em i c r o s c o p e ；D N A f r a g m e n t a t i o nw a s v i s u a l i z e db y a g a r

4、 o s eg e le l e c t r o p h o r e s i s ；C e l la p o p t o s i s r a t ea n d c e l lc y c l ea r r e s tw a s d e t e c t e db yf l o wc y t o m e t r y ：T h e p 2 1 ”a l l 7 。1 9 1 m R N A e x p r e s s i o nw a sd e

5、 t e c t e db yR T - P C R ．R e s u l t s ：C e l l sp r o l i f e r a t i o nw a s i n h i b i t e db yF K 2 2 8 o na t i m e ·- a n d - ·d o s ed e p e n d e n tm a n n e r ．T h es e m i —i n h i b i t o r yc

6、o n c e n t r a t i o n ( I C s 0 ) v a l u ea f t e r t r e a t e d w i t hF K 2 2 8 o n H e p G 2 f o r2 4 、4 8a n d 7 2 h o u r s w a s 8 ．7 、7 ．0 、5 ．8 n g ／m lr e s p e c t i v e l y ．A f t e rt r e a t e dw i t hF

7、K 2 2 8 f o r2 4h ，m o r p h o l o g i c a lc h a n g e so f t y p i c a la p o p t o s i sw e r eo b s e r v e d ．A g a r o s eg e le l e c t r o p h o r e s i so fH e p G 2D N A t r e a t e dw i t hF K 2 2 8 ( f r o m4

8、 ．0 n g ／m 1 ) f o r2 4hr e v e a l e d“l(fā) a d d e r ”p a t t e m ．T h e f l o w c y t o m e t r y p r o f i l e s r e v e a l e d t h a t F K 2 2 8i n d u c e dH e p G 2G 0 ／G 1 a r r e s t i n g ．T h ee x p r e s s i o

9、no f p 2 1 ”時‘／t i p l m R N Ai n c r e a s e d i nH e p G 2 a f t e rt r e a t e d w i t h8 ．O n g ／m lF K 2 2 8 f o r2 4 h o u r s ．C o n e l u s i o n ：F K 2 2 8i n h i b i t sp r o l i f e r a t i o n ．i n d u c t sa

10、 p o p t o s i sa n d G la r r e s t i n go f H e p G 2c e l l si n at i m e ．a(chǎn) n d ．d o s ed e p e n d e n tm a n n e ri nv i t r o ．F K 2 2 8 m a y i n c r e a s et h e p 2 1 ”3 川?！畃 1m R N A i nH e p G 2 c e l l ．K e