氨基多糖納米微粒抗人肝細(xì)胞癌的作用與機(jī)理研究.pdf

1、氨基多糖是一種天然的陽(yáng)離子多糖，因其具有無(wú)毒、生物兼容性、可降解性和低免疫原性等一系列獨(dú)特的特性而被廣泛應(yīng)用于食品、制藥、生物醫(yī)學(xué)等多個(gè)領(lǐng)域。氨基多糖納米微粒因具有黏膜黏附性和提高大分子在黏膜上的穿透能力，而主要作為一種藥物載體來(lái)進(jìn)行藥物控釋?zhuān)邢蚪o藥等方面的研究。本課題組在前期研究中發(fā)現(xiàn)，氨基多糖納米微粒具有抗腫瘤活性，在腫瘤的治療中具有一定的應(yīng)用前景。
　　 本研究通過(guò)體外細(xì)胞培養(yǎng)和裸鼠移植瘤模型，對(duì)氨基多糖納米微?？垢渭?xì)胞

2、癌的效果和機(jī)理作了初步的研究，旨在為氨基多糖納米微粒應(yīng)用于肝癌治療提供科學(xué)依據(jù)。
　　 主要研究結(jié)果如下：
　　 1.通過(guò)乙酸酐乙?；?，降低氨基多糖的脫乙酰度(D.D.)，并將其制備成納米微粒，與相同條件下制備的高脫乙酰度的氨基多糖納米微粒的形態(tài)特征對(duì)比發(fā)現(xiàn)，低D.D.氨基多糖的粒徑較大，Zeta電位較低，在溶劑中分布不均，穩(wěn)定性較差。體外對(duì)人肝癌細(xì)胞BEL-7402增殖抑制率測(cè)定結(jié)果顯示兩種D.D.氨基多糖納米微粒均

3、能抑制BEL-7402的生長(zhǎng)，并都在一定濃度范圍內(nèi)具有劑量依賴(lài)性。高D.D.的氨基多糖納米微粒對(duì)BEL-7402的抑制率明顯高于低D.D.的氨基多糖納米微粒。提示：氨基多糖分子上的氨基是維持其納米微粒形態(tài)，發(fā)揮抗腫瘤活性的關(guān)鍵基團(tuán)。
　　 2.腫瘤細(xì)胞蛋白鞘磷脂酶活性分析結(jié)果顯示，氨基多糖納米微粒能引起腫瘤細(xì)胞中性鞘磷脂酶(nSMase)和酸性鞘磷脂酶(aSMase)活性的升高。提示：鞘磷脂酶活性升高可能是氨基多糖納米微粒引起腫

4、瘤細(xì)胞死亡的主要機(jī)理之一。
　　 3.裸鼠人肝癌SMMC-7721移植瘤實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，在實(shí)驗(yàn)的21d，與溶劑組（陰性對(duì)照）相比，口服氨基多糖納米微粒的試驗(yàn)組的相對(duì)腫瘤增殖率T/C為61.68％，阿霉素組（陽(yáng)性對(duì)照組）為48.67％，均對(duì)裸小鼠移植瘤的生長(zhǎng)有明顯的抑制作用(P<0.05)。移植瘤中壞死面積占總面積的比例測(cè)算結(jié)果顯示，陽(yáng)性對(duì)照組為35.26±11.87％，試驗(yàn)組為42.25±3.83％，均顯著大于陰性對(duì)照組(20.6

5、1±3.84％)(p<0.01)。肝和肺組織的形態(tài)觀察發(fā)現(xiàn)，氨基多糖納米微粒能有效改善因?yàn)槟[瘤生長(zhǎng)而引起的肝、肺的組織損傷。
　　 4.移植瘤免疫組化研究結(jié)果顯示，與對(duì)照組相比，氨基多糖納米微粒能顯著抑制血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體VEGFR2(P<0.01)和增殖細(xì)胞核抗原PCNA的表達(dá)(P<0.05)，但對(duì)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子VEGF的表達(dá)則沒(méi)有影響。實(shí)時(shí)熒光定量PCR分析結(jié)果顯示，氨基多糖與阿霉素均能顯著抑制VEGFR2的轉(zhuǎn)錄(P<0