側柏炭質量標準及止血機理研究.pdf

1、側柏葉，為柏科植物側柏(Platycladus orientalis(L.)Franco)的干燥枝梢及葉，始載于《神農本草經》并列為木部上品，其味苦，入肺、肝、脾經，主吐血衄血痢血，崩中赤白，輕身益氣，令人耐寒暑，去濕痹，止饑。為燥濕仙丹，系補陰要藥，中醫(yī)臨床常用于涼血止血，鎮(zhèn)咳祛痰。其生品已具有良好的止血作用，而各醫(yī)家遵循“紅見黑則止”的理論，更多地選取其炭制品入藥止血。
　　 本課題以中藥飲片側柏炭為對象，研究內容主要包括五

2、大部分：文獻研究、止血機理研究、飲片炮制工藝規(guī)范化研究、質量標準研究和指紋圖譜研究。各部分研究內容概述如下：
　　 1.文獻研究
　　 查閱相關古今文獻，系統(tǒng)整理國內外多家學者的研究成果及專著論述，對本課題的研究對象側柏葉的炮制歷史沿革、化學成分、質量標準、藥理作用及臨床應用等各方面資料進行綜述。
　　 2.止血機理研究
　　 采用小鼠經典藥理血證模型，以小鼠出血時間和凝血時間為指標，對側柏炭的各化學部位

3、進行藥效學篩選，結果表明側柏炭總黃酮部位是其止血作用主要活性部位。同時對側柏葉炒炭前后的總黃酮含量、鞣質含量及化學成分相對含量的變化進行初步探討，結果表明側柏葉經炒炭后總黃酮含量相對生品下降了26.57％，而槲皮素相對含量升高了37.27％；鞣質含量相對下降了48.15％，而無明顯化學成分的相對提高；吸附力炭品較生品略提高了2.67％。因此我們初步推斷側柏葉炒炭前后黃酮類成分的變化與其止血作用的增強有緊密關系，并確定以槲皮素為指標，進行

4、后續(xù)炮制工藝及質量標準研究。
　　 3.飲片炮制工藝規(guī)范化研究
　　 本課題以槲皮素為指標，利用智能化滾筒式炒藥機對側柏炭實驗室炮制工藝進行驗證，同時結合正交設計，以炒制溫度與炒制時間為因素，優(yōu)選出最佳炮制工藝參數。結果表明，實驗室設備與生產設備有較大差距，應以生產設備為準，并優(yōu)選出側柏炭炮制的最佳工藝為炒制溫度控制在250℃，炒制時間6min。該工藝穩(wěn)定可行，以此條件制備出10批次側柏炭中試飲片，得率均在85％以上，滿

5、足工廠生產要求。
　　 4.質量標準研究
　　 采用藥典規(guī)定項下各方法對側柏炭飲片進行定性鑒別研究，包括顯微、理化、薄層鑒別；各項檢查，包括水分、灰分、浸出物、重金屬及砷鹽檢查；以及總黃酮和槲皮素的含量測定等，初步制訂了側柏炭飲片的質量標準草案：水分不得過6.0％；總灰分不得過14.5％；酸不溶性灰分不得過4.0％；水溶性浸出物不得少于14.5％；50％乙醇溶性浸出物不得少于13.5％；側柏炭中總黃酮以槲皮素計，含量不得

6、低于0.035％；側柏炭中槲皮素(C1sH11O7)含量不得低于0.01％。
　　 5.指紋圖譜研究
　　 利用超高效液相色譜技術建立側柏炭飲片標準指紋圖譜，實驗采用小粒徑填料填充的Acquity UPLC BEH C18色譜柱(2.1mm×50mm，1.7μm)；以甲醇-1％甲酸溶液為流動相梯度洗脫；流速：0.2ml/min；柱溫：30℃；檢測波長：375nm；進樣量：2μl。對10批側柏炭中試飲片進行測定，標定共有峰