Cathepsin D表達(dá)水平變化對(duì)Raji細(xì)胞增殖及阿霉素敏感性的影響.pdf

1、山東大學(xué)碩士學(xué)位論文CathepsinD表達(dá)水平變化對(duì)Raji細(xì)胞增殖及阿霉素敏感性的影響姓名：萬海燕申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：內(nèi)科學(xué)（血液?。┲笇?dǎo)教師：王欣20090505山東大學(xué)碩士學(xué)位論文ADM處理48h。四甲基偶氮唑藍(lán)(MTT)法檢測(cè)不同密度Raji細(xì)胞的增殖曲線，據(jù)此選取適宜用來進(jìn)行48h內(nèi)Raji細(xì)胞的增殖活性測(cè)定的細(xì)胞密度。MTT法測(cè)定細(xì)胞增殖抑制率，以ADM的48hIC50作為本實(shí)驗(yàn)的工作濃度。Westernblot法檢測(cè)

2、ADM處理前后各組Raji細(xì)胞Cath—D表達(dá)水平的變化。MTT法檢測(cè)用PepA預(yù)處理后，Raji細(xì)胞對(duì)ADM敏感性的變化。3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理所有數(shù)據(jù)均用DPSV311專業(yè)版軟件分析。數(shù)據(jù)采用Xs、百分率表示，多組間均數(shù)比較采用方差分析，兩組間均數(shù)比較采用f檢驗(yàn)，兩參數(shù)間的相關(guān)性采用Spearman等級(jí)檢驗(yàn)。結(jié)果：1、在72h之內(nèi)，細(xì)胞密度為1X1035X104／mL范圍內(nèi)，隨時(shí)間延長，細(xì)胞呈線性關(guān)系生長(圖1)。細(xì)胞懸液密度為5X103]m

3、L時(shí)，72h內(nèi)MTT測(cè)定的OD值在可信區(qū)間范圍內(nèi)，且與時(shí)間呈良好的線性關(guān)系，適宜用來進(jìn)行48h內(nèi)Raji細(xì)胞的增殖活性測(cè)定。2、ADM工作濃度濃度為1、2、4、8、161xg／mL的ADM作用于Raji細(xì)胞48h后的抑制率分別為(1759426)、(4420605)、(6461252)、(73824332)和(79364121)％。48hADM的IC50為315Irtg／mL，并以此藥物濃度為工作濃度進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)。3光學(xué)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)

4、學(xué)變化光學(xué)顯微鏡結(jié)果顯示正常培養(yǎng)條件下Raji細(xì)胞為飽滿的圓形，懸浮生長，突起較少，胞體透亮，折光性好，胞內(nèi)顆粒較少，相鄰細(xì)胞生長融合成片，生長狀態(tài)良好。經(jīng)ADM處理后，胞體內(nèi)顆粒逐漸增多，細(xì)胞間連接消失，胞體變大或收縮、出泡，細(xì)胞核高度凝聚，或者碎裂呈梅花樣，細(xì)胞形態(tài)變得模糊，不完整，有的可見凋亡小體形成，隨著作用濃度增高，凋亡細(xì)胞數(shù)增多，凋亡形態(tài)更明顯(圖2、圖3)。4、處理前后各組CathD表達(dá)水平變化CathD在Raji細(xì)胞中有