rhG-CSF動員對異基因外周血造血干細(xì)胞移植供者外周血CD4+T細(xì)胞極化和遷移的影響.pdf

1、研究背景:
　　異基因造血干細(xì)胞移植(allogeneic hematopoietic stem cell transplantation, allo-HSCT)目前仍是治療血液系統(tǒng)腫瘤重要的手段之一。異基因外周血干細(xì)胞移植(allogeneic peripheral blood stem cell transplantation,allo-PBSCT)與傳統(tǒng)的骨髓移植(bone marrow transplantation,BM

2、T)相比具有移植物采集方便,移植物植入和造血重建快,感染發(fā)生率低等優(yōu)點(diǎn),allo-PBSCT已逐漸顯現(xiàn)取代BMT的趨勢。隨著allo-PBSCT數(shù)量的增加,人們逐漸發(fā)現(xiàn)即使外周血干細(xì)胞移植物中淋巴細(xì)胞的數(shù)目遠(yuǎn)遠(yuǎn)多于骨髓移植物,移植后急性移植物抗宿主病(acute graft-versus-host disease,aGVHD)的發(fā)生率及嚴(yán)重程度并未明顯增加。因而人們開始研究allo-PBSCT后aGVHD發(fā)生率并未增加是否與干細(xì)胞動員過

3、程中應(yīng)用重組人粒細(xì)胞集落刺激因子(recombinant human granulocyte colony stimulating factor, rhG-CSF)有關(guān)。目前很多研究已經(jīng)證實(shí)在 allo-PBSCT中 rhG-CSF能通過免疫調(diào)節(jié)作用減低 aGVHD的發(fā)生率;rhG-CSF動員后供者外周血T細(xì)胞的數(shù)量和功能均發(fā)生了變化。
　　研究目的:
　　本課題組的前期研究發(fā)現(xiàn)G-CSF動員后CD4+T細(xì)胞表面的淋巴細(xì)胞功

4、能相關(guān)抗原1(lymphocyte function associated antigen-1,LFA-1)的表達(dá)沒有發(fā)生變化,對細(xì)胞間黏附分子1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)的黏附能力顯著下降,提示在動員過程中G-CSF可能抑制了LFA-1/ICMA-1信號通路。LFA-1/ICAM-1信號通路不僅能影響 T細(xì)胞的粘附,還能影響 T細(xì)胞的極化和遷移功能。為此本研究旨在觀察 G-CS

5、F動員通過LFA-1/ICAM-1信號途徑對CD4+T細(xì)胞的極化和遷移能力的影響。
　　研究方法與結(jié)果:
　　(1)采集10例allo-PBSCT供者于rhG-CSF動員后第5天和10例健康志愿者的外周血10ml,密度梯度離心法分離單個(gè)核細(xì)胞,使用免疫磁珠分選純化 CD4+ T細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測純化后 CD4+ T淋巴細(xì)胞的純度為(98.3±1.5)％;均在95%以上。
　　(2)使用倒置顯微鏡觀察CD4+T細(xì)胞接受

6、基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1α(stroma cell-derived factor-1α,SDF-1α)和ICAM-1信號刺激后細(xì)胞的極化。結(jié)果顯示,rhG-CSF動員后的供者 CD4+T細(xì)胞的極化比例為(32.42±4.91)%,健康志愿者為(56.55±5.35)%,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);
　　(3)使用激光掃描共聚焦顯微鏡檢測CD4+T細(xì)胞接受SDF-1α和ICAM-1信號刺激后細(xì)胞的遷移能力。rhG-CSF動員后的供者