β2受體激動劑對小鼠骨髓來源的樹突狀細胞功能的影響.pdf

1、本文研究目的：以小鼠骨髓來源的樹突狀細胞(BMDC)為研究目標，通過加入不同濃度的β2受體激動劑沙丁胺醇處理的方法，研究β2受體激動劑對BMDC的形態(tài)、凋亡、分化成熟、吞噬、分泌、刺激T細胞增殖等功能的影響。以此來探索β2受體激動劑對于支氣管哮喘治療的新機制。 研究方法：采用GM-CSF體外擴增C57BL/6小鼠BMDC的方法，于BMDC培養(yǎng)第6天給予不同濃度的沙丁胺醇干預，于第7天加入外源性脂多糖(LPS)，于培養(yǎng)第8天收集B

2、MDC。光鏡及電鏡下觀察BMDC的形態(tài)變化；流式細胞儀檢測BMDC的凋亡情況及表面共刺激分子CD80、CD86、CD40、CD11c+及MHC-Ⅱ類分子的表達；流式細胞儀檢測BMDC對于外源性抗原DEXTRAN的吞噬能力；AlamarBlue法檢測BMDC刺激同種小鼠脾T淋巴細胞增殖反應的能力；ELISA法檢測上清中細胞因子IL-12p70的水平。 研究結果：①10-4mol/l丁胺醇作用于小鼠BMDC48小時后，能使其MHC-

3、Ⅱ、CD86的平均熒光強度降低45％-55％；②LPS刺激BMDC成熟的飽和濃度為0.1μg/ml，超過這一濃度的LPS對BMDC成熟的促進作用逐漸減弱；③10-3mol/L沙丁胺醇可明顯誘導BMDC凋亡，細胞的晚期凋亡率明顯增高(P＜0.05)；④經(jīng)10-4mol/l沙丁胺醇干預后的BMDC與未經(jīng)藥物干預相比，電鏡下其表面的樹枝狀突起較短，且向細胞表面縮成團狀；⑤小鼠BMDC經(jīng)10-4mol/l沙丁胺醇處理后，其吞噬外源性抗原DEXT