醒腦解郁膠囊對卒中后抑郁大鼠模型海馬ERK1-2表達的影響.pdf

1、目的:建立卒中后抑郁(post-stroke depression，PSD)大鼠模型，觀察醒腦解郁膠囊對PSD模型大腦海馬區(qū)p-ERK1/2及p-ERK1/2mRNA的干預作用，從細胞分子水平探討醒腦解郁膠囊治療PSD的作用機制，從而為臨床更為廣泛的運用醒腦解郁膠囊治療PSD提供可靠的實驗依據(jù)。
　　方法:
　　1.采用右側大腦中動脈線栓(MCAO)法制備永久性局灶性腦缺血模型，在腦缺血模型的基礎上聯(lián)合孤養(yǎng)法加利血平法制備P

2、SD大鼠模型。
　　2.健康SD大鼠120只，雌雄各半，體重200±20g，根據(jù)曠野實驗得分，將大鼠隨機分為8組，即空白對照組、空白中藥組、空白西藥組、模型組、中藥早期干預組，西藥早期干預組、中藥治療組、西藥治療組。
　　3.適應性喂養(yǎng)1周后，除空白對照組、空白中藥組、空白西藥組外，其余各組均制備腦缺血模型，在腦缺血模型的基礎上采用孤養(yǎng)法及皮下注射利血平法（連續(xù)16天）制備PSD模型。于腦缺血模型制備成功后次日開始給予空白中

3、藥組、空白西藥組、中藥早期干預組、西藥早期干預組大鼠灌胃，連續(xù)37天;PSD模型制備成功后給予中藥治療組、西藥治療組灌胃，連續(xù)16天。中藥各組均給予醒腦解郁膠囊0.4125g/kg溶于2ml蒸餾水灌胃，西藥各組均給予百憂解按2.08mg/kg、拜阿司匹林3.0mg/kg溶于2ml蒸餾水內灌胃。
　　4.分別于造模后第2天、15、37天測量各組大鼠的體重、糖水消耗量及敞箱實驗得分，以觀察醒腦解郁膠囊對中風并發(fā)郁證大鼠模型上述各項指標

4、的影響。
　　5.運用免疫組化分析各組大鼠海馬組織中磷酸化的細胞外調解蛋白激酶(p-ERK1/2)的含量。
　　6.采用RT-PCR法檢測醒腦解郁膠囊對PSD大鼠海馬組織中p-ERK1/2mRNA表達的影響。
　　結果:
　　1.醒腦解郁膠囊對PSD大鼠體重及行為學的影響
　　造模后，與空白對照組、空白中藥組及空白西藥組相比，造模后各組大鼠均出現(xiàn)不同程度的神經功能缺損癥狀，體重、糖水消耗量明顯下降，大鼠的水

5、平運動及垂直運動得分也顯著減少;給藥治療后，與模型組相比，其余各組的上述各項指標均顯著提高，且以中藥早期干預組和西藥早期干預組療效最為明顯，提示醒腦解郁膠囊可增加PSD模型大鼠的體重、糖水消耗量、垂直運動及水平運動，并可促進其神經功能的恢復。
　　2.各組大鼠海馬組織p-ERK1/2含量的檢測
　　與空白對照組相比，模型組大鼠海馬區(qū)p-ERK1/2細胞數(shù)顯著減少，排列松散且陽性表達顏色較淺，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01);

6、與模型組比較，中藥早期干預組、西藥早期干預組、中藥治療組及西藥治療組大鼠海馬區(qū)p-ERK1/2陽性表達顏色較深，細胞數(shù)明顯增加，且排列緊密、有序，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，但是與空白對照組比較，陽性細胞數(shù)減少(P＜0.05);中藥早期干預組與中藥治療組相比無明顯差異;中藥治療組與西藥治療組比較海馬區(qū)各陽性細胞數(shù)無顯著差異(P＞0.05)。
　　3.各組大鼠海馬組織p-ERK1/2mRNA表達的測定
　　與空白對照組相

7、比，模型組大鼠海馬區(qū)p-ERK1/2mRNA表達明顯降低，具有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）;與模型組相比，中藥早期干預組、西藥早期干預組、中藥治療組、西藥治療組大鼠海馬區(qū)p-ERK1/2mRNA表達均不同程度的增加，具有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）;其中中藥治療組與中藥早期干預組之間比較無明顯差異;中藥治療組和西藥治療組比較無顯著差異(P＞0.05)。
　　結論:
　　1.MCAO、孤養(yǎng)法、皮下注射利血平法聯(lián)合造模方法，可成功制

8、備PSD大鼠模型。
　　2.PSD模型大鼠毛色晦暗無華、進食減少、體重減輕、懶動、活動速度變緩、糖水消耗量減少，并出現(xiàn)不同程度的神經功能缺損癥狀。以上部分表現(xiàn)類似于臨床PSD患者的癥狀及病理改變，經醒腦解郁膠囊灌胃治療后上癥均有所改善。
　　3.醒腦解郁膠囊可提高PSD大鼠模型海馬組織內p-ERK1/2的含量，并能上調p-ERK1/2mRNA的表達水平，提示保護應激引起的神經元受損并促進神經細胞再生可能是醒腦解郁膠囊治療PS