高血糖對大鼠局灶性腦缺血再灌注后神經(jīng)細胞凋亡及Cyt-C、caspase-3表達的影響.pdf

1、目的:探討高血糖對大鼠局灶性腦缺血再灌注后神經(jīng)細胞凋亡及細胞色素-C(Cytochrome-C，Cyt-C)、半胱氨酸天門冬氨酸蛋白酶-3(cysteinylaspartate specificproteinase-3， caspase-3)表達的影響，進一步探討其加重腦缺血損傷的作用機制。
　　 方法:30只雄性SD(Sprague-Dawley)大鼠隨機分為三大組:高血糖組、正常血糖組、假手術(shù)組。按體質(zhì)量4g/kg給予大鼠尾

2、靜脈注射25％葡萄糖，造成大鼠高血糖狀態(tài);繼而采用改良大腦中動脈阻塞(middle cerebral artery occlusion，MCAO)法建立大鼠局灶性腦缺血再灌注模型。于缺血2h后再灌注24h采用Bederson評分標(biāo)準(zhǔn)進行神經(jīng)功能評分、末端脫氧核糖核苷酸轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的dUTP口末端標(biāo)記技術(shù)(terminaldeoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP-biotin nick end l

3、abeling assay,TUNEL)染色檢測凋亡細胞計數(shù)、免疫組織化學(xué)染色(immunohistochemistry，IHC)方法檢測鼠腦缺血再灌注皮質(zhì)區(qū)Cyt-C、caspases-3的表達情況，并以MiVnT顯微生物圖像分析系統(tǒng)進行圖像分析。
　　 結(jié)果:1，神經(jīng)功能評分:高血糖組神經(jīng)功能評分為(3.80±0.42)分，正常血糖組為(3.30±0.48)分，假手術(shù)組為(0.00±0.00)分，高血糖組及正常血糖組的神經(jīng)功

4、能評分較假手術(shù)組均顯著增高(P＜0.01），而高血糖組較正常血糖組增加明顯(P＜0.05）。2，神經(jīng)細胞凋亡計數(shù):高血糖組凋亡細胞數(shù)為(19.10±0.99)個，正常血糖組為(17.50±1.08)個，假手術(shù)組為(0.67±0.58)個，高血糖組及正常血糖組的凋亡細胞數(shù)較假手術(shù)組明顯增多(P＜0.01)，且高血糖組較正常血糖組增多顯著(P＜0.05)。3，Cyt-C和caspase-3表達:高血糖組Cyt-C和caspase-3灰度值分

5、別為(106.70±1.77)、(107.20±1.69)，正常血糖組分別為(113.10±1.52)、(115.10±1.20)，假手術(shù)組分別為(147.67±3.21)、(147.67±1.53)。高血糖組及正常血糖組的Cyt-C和caspase-3表達水平均較假手術(shù)組顯著增強(P＜0.01），且高血糖組比較正常血糖組增強明顯(P＜0.05）。
　　 結(jié)論:Cyt-C、caspase-3的激活及表達增強，可能是高血糖加重腦缺